脑脊液髓鞘碱性蛋白测定

1.概述髓鞘碱性蛋白（MBP）是神经髓鞘中特有的抗原性最强的蛋白质。当神经组织受破坏时，髓鞘碱性蛋白及其碎片释放入体液中，因此体液中髓鞘碱性蛋白含量的高低可反映脑白质及髓鞘的破坏过程，体液中髓鞘碱性蛋白含量测定是活动性髓鞘降解的一项有用的特异性指标。

2.方法取脑脊液（普通管）2mL。双抗体夹心法检测活性，协和医院改良实验步骤：标记聚苯乙烯酶标板10分钟，以检测缓冲液稀释酶联抗体结合物浓缩液。准备酶联抗体结合物溶液15分钟，将50μl标准液（A～G共7种14孔），对照组（水平1和2共4孔）或待测液（有78孔）加入酶标板45分钟，将50μl检测缓冲液加入每一孔孵育15分钟。室温（25℃）摇摆2小时，孵育12分钟，用洗液吸洗5次，干燥机干燥30分钟。加100μl酶联抗体结合物溶液人每一孔，孵育15分钟，室温（25℃）摇摆2小时。用洗液吸洗5次，干燥30分钟，将100μl TMB显色液加入所有孔，孵育15分钟。室温（25℃）摇摆10分钟，加100μl终止液15分钟，在30分钟内以酶标仪450mm读数。计算：每一个标准液，对照组或待测液的平均吸光度。用直线图纸或半对数纸以Y轴标绘平均吸光度读数，而X轴为MBP浓度（ng/mg）。(https://www.daowen.com)

以双份检测读数的平均值画出标准曲线。根据标准曲线，通过平均吸光度读数找出相对应的MBP浓度，确定对照组或待测液的MBP浓度。

3.临床意义主要用于多发性硬化、脑白质病、脱髓鞘性周围神经病等疾患的诊断及治疗监测。