3.2　筛选及鉴定流程

如图3-2所示，首先我们将GMR＞Egr M果蝇与含有染色体缺失片段的果蝇杂交，看子一代中果蝇的小眼表型是否增强或抑制。接下来对有增强或抑制效果的缺失片段，进一步分析该区域内所有小的缺失片段，将增强或抑制效果定位到大约100kb的染色体区域内。然后比对已知的果蝇基因组顺序，找出该区域编码的所有基因，通过利用已有的突变体、插入的P因子（P-element）、UAS-RNAi转基因品系或构建新的UAS-RNAi转基因株，鉴定出有增强或抑制效果的基因。最后将此基因的cDNA克隆到p UAST质粒中，通过转基因技术建立该基因的过表达品系，在眼中表达并观察能否挽救（rescue）此前发现的增强或抑制效果。最后我们还将利用GMR＞Egr S产生的较强小眼表型对候选基因进行进一步的验证，从而最终确定该基因对于Egr诱导的小眼表型的调控作用。

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图3-2　遗传筛选及鉴定流程示意图