细菌性感染的诊断

一、细菌性感染的诊断

病原菌能引起多种感染和传染病。细菌性感染的实验室诊断包括以检测病原菌及其抗原产物或核酸为目的的细菌学诊断及以检测患者血清中特异抗体为目的的血清学诊断。

（一）细菌学检查

1.采集标本　标本的采集与送检的质量直接关系到病原菌检出的成败。为提高检出率，避免诊断错误，应遵守以下几项原则：

（1）根据不同疾病以及疾病的不同时期采集不同标本。

（2）严格无菌操作，避免标本被污染。

（3）在疾病早期以及抗菌药物使用前采集标本。对已使用抗菌药物患者的标本应注明药物种类，以便实验室采取适当措施处理。

（4）采集的标本必须尽快送检。大多数细菌标本可以冷藏送检。但对某些细菌，如脑膜炎奈瑟菌送检中要注意保温。

（5）标本做好标记，详细填写化验单，以保证各环节准确无误。

2.直接涂片镜检　对一些在形态与染色性上具有特征的病原菌，可取标本涂片、染色镜检。镜下见到典型的菌体形态、排列、染色性即可做出初步诊断。如刺破瘀血点或脑脊液标本涂片，镜下发现肾形成双排列的G－球菌，对于脑膜炎奈瑟菌具有诊断意义。如果直接涂片找不到典型细菌时，也不能否定。因为脑膜炎奈瑟菌从瘀血点涂片检出的阳性率约为80%，加上脑脊液标本涂片检查的总阳性率也只有90%。必要时还需作其他检查。结核病患者痰的直接或浓集后涂片经抗酸染色镜检，发现了分枝状的抗酸杆菌，亦有诊断价值。该方法简便、易行，为临床检验常用。但很多细菌的形态、排列、染色性并无特征，如肠道致病菌多数为G－杆菌，粪便标本直接涂片镜检不能区分，必须进行分离培养方能鉴定。

3.分离和鉴定　根据不同疾病采取不同标本如血、尿、粪便、咽拭子以及脑脊液等进行细菌的分离和鉴定，是确诊细菌性感染最可靠的方法。鉴定的主要内容有：

（1）培养特征：用无菌手续取待检标本，按不同目的接种于普通琼脂平板、血液琼脂平板或选择培养基（有些还须先经增菌培养），以获得细菌的纯培养。根据细菌所需要的营养、生长条件、菌落特征来做初步鉴别。如化脓性链球菌在血液琼脂平板上生长出小而透明的菌落，菌落周围有完全溶血环。肠道病原菌可根据在选择培养基上生长出来的菌落颜色、大小等性状识别。但最后确诊还须进行形态特征、生化反应和血清学鉴定。(https://www.daowen.com)

（2）形态特征：通过分离培养，对在固体或液体培养基上长出的菌落或纯培养物，经涂片染色后镜检。根据细菌的形态、排列、大小、染色性以及特殊结构等做初步鉴定。

（3）生化反应：细菌的生化反应特点可作为鉴别细菌的依据。如对肠道致病菌进行鉴定，生化反应是不可缺少的。各种肠道致病菌对不同种类的糖发酵能力不同，故利用含不同糖的培养基进行生化反应，其结果可作为进一步鉴别的依据。现在多种微量、快速、半自动或全自动的细菌生化反应试剂盒和检测仪器已广泛应用于临床，如SCEPTOR细菌鉴定仪。

（4）血清鉴定：是根据血清反应的特异性，利用已知的特异性抗体检查未知细菌抗原，以确定细菌的种、型。如用志贺菌属、沙门菌属等的特异性多价、单价诊断血清，与分离的待检菌作玻片凝集试验，鉴定菌种和确定菌型，是细菌学检验的常规方法。

（5）动物试验：可测定某些细菌的毒力，但须选择敏感动物。动物试验除能测定细菌的毒力外，尚可分离病原菌。即将混有杂菌或含病原菌量极少的标本接种于敏感动物体内，非病原菌被动物体杀死，而病原菌则在易感动物体内生长、繁殖，待动物发病并出现特有的症状后立即解剖，较易分离出致病菌。例如，取可疑为结核病人的标本接种豚鼠，感染后可检出结核分枝杆菌。此外，动物试验还能测定细菌的产毒性，常用白喉棒状杆菌培养滤液给豚鼠皮下注射，检测细菌的产毒性；还可利用结扎家兔肠袢测定大肠埃希菌的不耐热肠毒素。

（二）血清学诊断

病原菌感染后，细菌的各种抗原便可刺激机体的免疫系统，产生特异性抗体。

用已知抗原检测病人血清中或其他体液中未知抗体及其量的变化，亦可作为该感染性疾病的辅助诊断。由于抗体存在于血清或其他体液中，故通常称为血清学反应或血清学诊断。此法也可用于调查人群对该病原体的免疫水平及检测预防接种效果。

血清学诊断一般适用于抗原性较强，以及病程较长的传染病诊断。在血清学诊断中，通常采取双份血清。因为在传染病流行区，健康人群由于某些病原菌的隐性感染或近期接受预防接种，其抗体水平普遍较高，单份血清往往不能区分现症感染或既往感染。如果恢复期或1周后血清抗体效价比早期升高4倍以上（含4倍）时，则可确认为现症感染。

血清抗体效价受多种因素影响。如早期应用抗菌药物及年老、体弱、免疫功能低下等情况。此时感染后抗体效价可无明显升高。故抗体效价低时不要轻易否定。

血清学诊断方法较多，常根据病菌种类加以选择。