病毒感染的血清学诊断
应用血清学方法诊断病毒性疾病,其原理是用已知病毒抗原来检测病人血清中有无相应抗体,故须待病人感染后体内产生抗体时才能检出。这显然不能进行早期诊断,故对临床帮助不大。但遇下列情况时仍需做血清学诊断:①采取标本分离病毒为时已晚。②目前尚无分离此病毒的方法或难以分离的病毒。③为证实所分离的病毒有临床意义。④进行血清流行病学调查,以研究病毒性感染的流行规律等。另外,在采取临床标本及病人血清应注意病程,必须采取患者急性期血清与恢复期血清(双份血清)进行血清学试验。若第2次血清抗体滴度比第1次高出4倍以上时,才有诊断意义。
(一)中和试验
是病毒在活体内或细胞培养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验,可用来检查患者血清中抗体的消长情况,也可用来鉴定未知病毒或研究病毒的抗原结构。做法是用系列稀释的病人血清与等量的已知病毒悬液(100TCID50或100ID50)混合,置37℃作用1小时,在培养细胞(鸡胚或实验动物)中滴定感染性,以能保护半数细胞培养管(或孔)不产生CPE的血清最高稀释度(或以能抑制病毒在半数鸡胚或动物中增殖的血清最高稀释度)作为终点效价。用细胞培养作中和试验较用其他方法经济而方便,故常被采用。中和抗体(NTAb)是作用于病毒表面抗原(衣壳或包膜)的抗体,同种不同型病毒间一般无交叉,特异性高,而且抗体在体内维持时间长。中和抗体阳性不一定表示正在感染中,也可能因以前有过隐性感染所致。因此,中和试验适用于人群免疫情况的调查,在临床诊断上较少使用。
(二)补体结合试验
用已知病毒可溶性(CF)抗原来检测病人血清中相应(CF)抗体。CF抗原是病毒的内部抗原,同种异型间常有交叉,故特异性较中和试验低。但CF抗体出现较早,消失较快,故CF阳性可作为近期感染的指标。(https://www.daowen.com)
(三)血凝抑制试验
具有HA的病毒能凝集鸡、豚鼠、人等的红细胞,称血凝现象。这种现象能被相应抗体抑制,称HI试验。其原理是相应抗体与病毒结合后,阻抑了病毒表面的HA与红细胞的结合。本试验简易、经济,特异性高,常用于黏病毒及乙型脑炎病毒感染的辅助诊断及流行病学调查,也可鉴定病毒的型与亚型。
(四)凝胶免疫扩散试验
常用半固体琼脂糖进行抗原、抗体的沉淀反应,方法简便、特异性与敏感性均较高,而且又衍生出对流免疫电泳和火箭电泳等更为敏感的检测技术。此法在病毒性疾病中主要用于诊断HBV与乙型脑炎病毒等感染。