3.5 基因“钓鱼”技术—FISH在血液肿瘤诊治中的作用
很多血液病患者在就诊治疗过程中，发现医生会开一些检查，其中包括FISH检查。大部分患者并不十分了解FISH检查，会有一些疑惑，什么是FISH？我为什么要做FISH？本小节就来给大家一一解答。
什么是FISH
大家看到FISH可能想到的是鱼的英文单词“fish”，但是在我们血液病诊断中它有另一个名字，叫荧光原位杂交技术，是一种诊断技术，可以用来帮助血液肿瘤的诊断。
在认识荧光原位杂交技术之前，先了解一下什么是基因。在我们的每个细胞里有46条染色体，每条染色体上都有上千个基因（图3.8）。我们的生、长、衰、病、老、死等一切生命现象都与这些基因有关，当正常的基因发生变化时我们可能就生病了。我们的FISH技术就可以检测相关的基因。
图3.8 细胞核、染色体与基因的关系
荧光原位杂交技术形象地说就像钓鱼一样，把一段基因片段和可以发出荧光的荧光素直接或间接结合起来当作鱼饵，放入要检测的样本中，就像鱼儿咬住了鱼钩一样，让它和细胞染色体中的这个片段结合，通过观察荧光信号这条“鱼线”，就可以知道细胞中这些特定序列是否存在或者是否发生了改变。所以，我们也把FISH称为“钓鱼”技术（图3.9）。
图3.9 FISH技术示意图
那荧光信号又是什么样子的呢？现在临床多使用双色FISH，还有多色原位FISH和涂抹FISH等，多用于复杂血液疾病检测或者科研使用。重庆市新桥医院血液病医学中心现在使用的是双色FISH，也就是说我们观察的荧光信号是两个颜色，红色和绿色（图3.10）。但是当发出红色信号的基因和发出绿色信号的基因融合在一起的时候就只能看到黄色的信号了，我们就是这样来判断细胞内是否出现异常的融合基因或者某些基因是否异常断裂了。我们也可以通过观察信号点的个数来判断是否有某个基因的缺失或者是扩增。得到的这些结果可以帮助我们更准确快速地诊断疾病或对疾病提供更有效的治疗。(https://www.daowen.com)
图3.10 荧光信号示意图
为什么要做FISH
①辅助诊断：血液肿瘤中有一些核酸序列的改变与某一疾病分型有很大的相关性，通过检测这些核酸序列可以帮助我们快速有效地诊断疾病。比如95%以上的慢性粒细胞白血病（CML）都伴有BCR/ABL融合基因的存在；AML1/ETO融合基因可见于92%的急性粒细胞白血病M2型AML患者中；PML/RARa融合基因可见于90%以上的急性早幼粒细胞白血病（APL）中，成为APL的一个特异标志。
②监测药物的使用效果：我们还可以通过检测骨髓或者外周血中肿瘤细胞（比如含有BCR/ABL融合基因的细胞）的百分比监测药物治疗的效果。CML患者在经过有效治疗之后，BCR/ABL融合基因阳性的细胞比例会大大降低，甚至降为阴性。
③指导选择用药：临床上有一些针对某些基因的药物，检测出是否含有这些基因可以帮助医生针对性地用药，以达到更好的疗效。
④监测异性别骨髓移植效果：进行了异性别干细胞移植的患者，通过检测骨髓中细胞的性染色体可以判断移植效果。比如一位女性患者的性染色体为XX，当她接受了男性供者的干细胞后，她骨髓中的细胞就会变成XY，我们通过检测患者体内含有XY的细胞百分比可以知道移植是否成功。定期检查还可以帮助我们监测患者是否旧疾复发，以便及时治疗。
FISH技术是在昏暗的环境中观察荧光信号点，这些信号点就好像一只只黑夜中的萤火虫一样，为我们血液肿瘤的诊治指引方向。
（作者：张雨薇）