一、传染源调查
(一)人群传染源调查
通过对人群进行血吸虫感染情况调查,能够及时发现血吸虫病病例和感染者,规范开展治疗和管理,有效控制和消除传染源,保护人群健康。
1.调查对象 原则上根据血吸虫病流行程度、防治目标和调查目的等确定调查对象、调查频次和检查方法。
对尚未达到传播阻断的流行村、病情或螺情有所反复的传播阻断村或近5年达到传播阻断的有螺村,每年在传播季节结束后1个月先用询检方法过筛,有疫水或可疑水体接触史的人群再采用免疫学筛查,阳性者采取病原学检查方法(尼龙绢袋集卵孵化法、改良加藤厚涂片法平行进行),以确定是否感染血吸虫。
已达到传播阻断5年以上的有螺村以及达到传播阻断的无螺村,每3年对本地6岁以上常住居民通过询检方法过筛,有疫水或可疑水体接触史的人群采用免疫学筛查,阳性者采取病原学方法(尼龙绢袋集卵孵化法、改良加藤厚涂片法平行进行),以此确定是否感染。
尚未达到传播阻断、已达传播阻断县、已达消除的县,每年对出入疫区的流动人口中有疫水或可疑水体接触史的人群、医疗卫生机构发现的临床诊断病例、疑似血吸虫病例和不明原因发热病人开展血吸虫病查病工作。
2.调查方法
(1)询检法:主要是了解受检人员是否有疫水接触史?是否需要做进一步的检查和治疗?即在末次接触疫水或可疑水体后是否接受过检测或治疗,或末次治疗后,有无疫水或可疑水体接触史及有无发热、腹泻等主要血吸虫病症状。主要操作步骤为:①材料准备:询检法调查登记表、听诊器、血压计等。②操作步骤:a.仔细询问受检者血吸虫病查治史、末次治疗时间及此后接触疫水地点、时间、接触方式及出现的症状。b.必要的体格检查排除其他非血吸虫病引起的发热、腹泻、肝肿大等临床症状体征。③结果判断:末次接触疫水或可疑水体后未接受过检测或检测阳性后未接受过治疗,末次治疗后有疫水接触史或疑似血吸虫病症状,定为本法阳性。④注意事项:应注意受检者接触水体地点周围的钉螺分布、感染情况;避免诱导性询问血吸虫病出现的临床症状和体征。
(2)病原学检查:病原学检查方法是确定感染的最直接、最可靠的指标。血吸虫病流行病学调查中最常用的病原学检查方法是改良加藤厚涂片法(Kato-Katz法)和尼龙绢袋集卵孵化法。其具体操作步骤见第五章第一节。Kato-Katz法是世界卫生组织(WHO)推荐的血吸虫病定量检测方法,我国多次血吸虫病抽样调查以及全国血吸虫病疫情、病情监测等都采用Kato-Katz法。然而Kato-Katz法检查粪量少,检出率高低与疫区人群感染度高低有关。当克粪虫卵数(EPG)为8时,Kato-Katz法的检出率只有42.9%,甚至更低。采用Kato-Katz法在轻度流行区查病会遗漏部分病人,特别是低感染度的居民,其粪便中虫卵的排出量少,并常发生波动,敏感性不高。Kato-Katz法诊断血吸虫病时不同涂片数的检出率存在差异,在低中度流行区增加涂片数可减少漏检。在感染度低的疫区,采用尼龙绢袋集卵孵化法较为适宜。尼龙绢袋集卵孵化法比Kato-Katz法阳性检出率高,漏检率低,但孵化法对孵化用水质量、孵化温度控制以及毛蚴鉴别技术要求较高,是影响检出率的重要因素。
人体感染血吸虫病后,血吸虫卵在体内肠黏膜沉积,引起肠黏膜一系列病理变化,以直肠和乙状结肠尤为显著。因此,直肠镜、乙状结肠镜作为血吸虫病病原学检查的一种方法,可以补充粪检血吸虫孵化和集卵之不足。该法对无治疗史患者易作出正确判断。对有治疗史的患者,由于血吸虫卵在肠组织的演变形态较为复杂,需要一定识别虫卵形态的经验或进行染色才能作出较为正确的判断。
由于粪便定量虫卵计数技术的发展,可以开展多方面的血吸虫病计量流行病学调查研究。
1)发现个体重感染者:从每个病人的EPG,可以评价个体病人在流行病学上的意义。
2)分析重点年龄组:按下列公式计算潜在污染指数(index of potential contamination,IPC)。
IPC=[年龄组的感染率(%)×年龄组的EPG×年龄组人口占总人口数的百分率(%)]÷100
以每一年龄组的IPC除以各年龄组IPC总和,算出相对IPC;从各年龄组的相对IPC找出该地排卵中占重要地位的人群,这就是防治中必须引起注意的重点人群。随着血吸虫病防治进程的发展,重点人群年龄组可以发生一定的变化。在防治初期往往10~19岁的相对IPC一般较高,防治后期中老年年龄组人群的相对IPC可能较高。
3)观察防治效果和疗效:用定量虫卵计数技术做防治工作前、后对比,可以观察病人和人群感染度的变化,以此观察传染源在传播中的作用。在治疗前、后作虫卵计数,可以观察到药物对不同感染度病人的疗效。(https://www.daowen.com)
4)分析EPG值与症状、体征的关系:对具有不同感染度病人作症状、体征分析,找出他们之间的计量关系。据各地观察,EPG值与脓血便者的比率呈相关关系,EPG值与症状、体征出现频度的高低也有相关关系。
(3)免疫学检查:随着我国血吸虫病防治工作的深入推进,我国血吸虫病疫情已经普遍降至历史最低水平。常规的病原学检测方法漏检率较高,难以评估血吸虫病疫情现状。免疫诊断方法具有较高的敏感性和特异性,已为临床诊断、流行病学调查和疫情监测广泛采用。从群体角度对不同流行区人群血吸虫抗体水平变化进行观察,可以替代病原学方法评估血吸虫病的流行程度。血吸虫病的血清流行病学是应用血清学技术,调查分析人群血清中血吸虫的特异性抗体、抗原的分布规律及其影响因素,以研究血吸虫病的流行病学问题。目前血吸虫病流行病学调查中常用血清免疫学方法,有间接血球凝集试验(IHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体染料试纸条法(DDIA)、金标免疫渗滤法(DIGFA)等免疫学方法等,环卵沉淀试验(COPT)、皮内实验(ID)等免疫学方法在20世纪使用较多,目前已很少使用。各种免疫学检查的操作步骤见第五章第二节。
血吸虫病血清流行病学调查的目的在于应用血清学试验,获得在具体地点、具体时间内人群(各个个体)血清中针对某种特异性抗原的抗体水平和人群抗体反应的流行病学资料。通过与疾病的传播水平、传播的变化及防治措施之间的相互关系的分析,结合常规的流行病学计量指标,估计血吸虫病的流行状况。通过人群血清抗体调查,系统了解群体免疫水平及其动态变化,可为制订当地血吸虫病防制工作重点提供科学依据,同时可预测疫情动态,推测血吸虫病流行的可能性及流行强度。此外,运用血清学方法对血吸虫病疫区居民进行连续多年的纵向观察,用以评价防治效果。血清流行病学调查与病原学调查的主要区别在于它不是提供调查时“点”的流行数据,即调查时可被寄生虫学诊断检出的个体数所占的比率,而是所谓“期”的流行数据,即人群中各个个体感染该疾病累计状况的总和。因此,确定人群免疫诊断试验结果的年龄相关特征在血清流行病学调查中具有关键意义。即对某特定人群,从整体角度对其患病状态做出诊断,血清流行病学调查能够反应血吸虫病在一特定地区的流行状况并提供新信息。
通常人群抗体水平是用人群抗体阳性率和人群抗体几何平均滴度(geometric mean reciprocal titer,GMRT)两个指标来表达。人群抗体反应的流行病学特征与年龄相关的血清学人口资料密切相关。年龄相关的血清学人口资料包括年龄相关的抗体出现率和年龄特异的抗体几何滴度。由于血清学资料反映感染的累积历史,为一种其间的流行数据。因此,在血清流行病学调查中,一定要确定调查对象的年龄相关特征。
血清学人口资料是指应用免疫诊断试验,通过对人群抗体反应水平的调查所获得的年龄相关的群体抗体反应结果。用血清学人口资料作为流行病学评价的指标不仅可更精确地了解疾病的流行性,且可获得在防治措施影响下传播变化的动态趋势。采用定量试验,根据年龄相关的抗体流行率和平均抗体水平作为指标,获取血清学人口资料,从群体角度对防治措施效果(含化疗效果和传播控制效果)作出评价和监测传播变化,为进一步预防和控制的决策和实施提供科学信息。
血清流行病学调查方法包括三种:①横断面调查(cross-sectional survey):对不同程度流行区或防制结果有差异地区的不同人群血清中的特异性抗体水平作一横向比较,以期获得血清抗体水平与流行状况之间的关系。②重复横断面调查(repeated cross-sectional survey):主要是纵向观察同一或不同地区人群血清中特异性抗体水平随化疗等防制措施的开展而动态变化的情况,以期通过抗体水平的波动规律来反映和评价防制措施的效果。③纵向调查(longitudinal survey):该种调查性质和用途类似重复横断面调查,由于需要各次调查中被调查对象一致,故更为精确和敏感,但在实施中较困难。
(4)B型超声检查:因血吸虫卵沉积肝脏引起肉芽肿,继后发生肝纤维化等一系列病理改变,特别是干线型纤维化,及门脉分支血管壁的增厚,可在超声诊断仪中显示有特征性图像,有助于血吸虫病的诊断。其操作步骤见第五章第三节。
(二)家畜传染源调查
日本血吸虫可以自然感染7目28属40多种哺乳动物,绝大部分可成为终宿主或保虫宿主,构成血吸虫病传染源。然而,常见而起重要传播作用的动物传染源有牛、羊、猪、狗、马、驴、骡等家畜。家畜血吸虫感染率与人的感染率以及钉螺感染率有较明显的一致性。调查家畜感染情况,可以反映一个地区血吸虫病流行现状及流行程度,确定主要传染源,为制订传染源控制措施提供依据。此外,可用于个体和群体水平上确定家畜化疗对象、评价化疗及预防控制效果。尽管2004年以来我国实施了以传染源控制为主的综合防控策略,大力开展了以机代牛、淘汰耕牛、封洲禁牧等一系列传染源控制措施,牛等主要家畜传染源得到显著控制,但牛、羊等家畜复养的风险不容忽视。因此,在当前的血吸虫病疫情形势下,家畜传染源调查仍是一项非常重要的工作。通过对家畜传染源进行调查,可以及时发现和处置感染血吸虫的家畜,消除畜源性血吸虫病传染源。
家畜传染源调查方法主要采用病原学检查和免疫学检查的方法。
1.病原学检查 家畜血吸虫感染的病原学检查方法主要包括粪便毛蚴孵化法、粪便虫卵检查法、解剖检查法等。粪便毛蚴孵化法主要包括尼龙筛淘洗法、沉淀换水法、塑料杯顶管法、棉析法等。粪便虫卵检查主要包括沉淀集卵法和尼龙筛兜集卵法等。解剖检查主要包括冲洗集虫检查、肝脏虫卵检查等。当前在实际工作中使用最多的是粪便毛蚴孵化法。具体操作方法见第十章第一节。
2.免疫学检查 免疫学检查方法主要包括间接血凝试验、酶联免疫吸附试验等。目前在实际工作中使用最多的是间接血凝试验。具体操作方法见第十章第一节。
(三)野生动物传染源调查
1.野鼠感染情况调查 对鼠类等体型较小的野生动物调查可采用设夹捕捉,解剖其肝肠部分,肉眼观察有无虫卵结节,并剪取肝脏和肠系膜组织在显微镜下观察是否有虫卵,对虫卵阳性者再用灌冲法冲洗门静脉和肠系膜静脉,观察是否有血吸虫成虫冲出。同时,取野鼠等肠内粪样,称重后孵化观察毛蚴,阳性者计数毛蚴和沉渣虫卵,计算感染率和感染度。
2.其他野生动物调查 联系当地农贸市场或餐馆,收集市售的当地野生动物的肝肠后,对肝脏进行肉眼和显微镜下观察,并取肠内粪样后进行沉淀镜检或棉析孵化检查,发现血吸虫虫卵或毛蚴为阳性。