4.液体培养方法

种子斜面培养基（%）：土豆汁20，纤维素粉2，琼脂2；或蛋白胨0.2，酵母膏0.1，琼脂2。

甘油无机盐培养基成分（%）［2］：甘油0.6，（NH4）2SO4 0.14，KH2PO4 0.2，尿素0.03，MgSO4·7H2O 0.03，CaCl2 0.03，蛋白胨0.1。每升含微量元素FeSO4·7H2 O 5毫克，MnSO4·H2 O 1.56毫克，ZnCl2 1.67毫克，CoCl2 2.0毫克，pH 5.3。在不同碳源试验中，用各种碳源（0.5%）代替上述甘油，其他培养基成分相同。培养中途加槐糖或甘油等的试验中，槐糖和甘油等均先分别灭菌，无菌操作加入。500毫升三角瓶中装入100毫升培养基，孢子悬浮液接种，每100毫升培养基中约接入106个左右的孢子，在往复式摇床（108次/分）上30℃震荡培养，至所需时间，取培养滤液测定酶活力。(https://www.daowen.com)