物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法
高温可使细菌菌体内的蛋白质变性、酶失活、DNA断裂，具有明显的杀菌作用。热力灭菌法分为干热灭菌法和湿热灭菌法两大类。
1.干热灭菌法 干热灭菌法是通过脱水干燥使大分子变性来杀菌的方法。
（1）焚烧 直接燃烧或在焚烧炉内焚烧，适用于处理废弃物品或动物尸体等。它是一种最彻底的灭菌方法。
（2）烧灼 直接用火焰灭菌，适用于实验室的接种环、试管口、玻璃器皿瓶口等的灭菌。
（3）干烤 用电热干烤箱灭菌，一般加热至160～170℃，持续2 h，可达到灭菌的效果。该方法适用于高温下不损坏、不变质、不蒸发的物品（如瓷器、玻璃器皿、玻璃注射器等）的灭菌。
2.湿热灭菌法
（1）煮沸法 在100℃的水中煮沸5 min可杀死细菌的繁殖体，1～3h可杀灭芽胞。此法常用于餐具、刀剪、注射器等的消毒。若往水中加入2%碳酸氢钠溶液，可提高沸点至105℃，增强杀菌作用的同时还可防止金属器皿生锈。
（2）巴氏消毒法 此法由巴斯德创建，故而得名。这是用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，从而避免其中的不耐热成分被破坏的一种消毒方法。操作方法为61.1～62.8℃持续30 min或71.7℃维持15～30 s，广泛用于不耐高温食品的消毒，如牛奶、酒类等。(https://www.daowen.com)
（3）高压蒸汽灭菌法 目前临床上最常用、最有效的灭菌方法，可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。高压蒸汽灭菌锅是一个密闭的器具，灭菌时的温度取决于锅内蒸汽的压力，随着压力不断增加，蒸汽的温度也相应升高。该方法所需的条件为压力在103.4 kPa，温度为121.3℃，维持15～20 min，即可达到灭菌效果。常用于手术器械、敷料、一般培养基、生理盐水等耐高温、耐湿物品的灭菌。
（4）流通蒸汽消毒法 利用蒸笼或阿诺蒸锅进行消毒的方法，采用温度不超过100℃的水蒸气进行消毒，经15～30 min可杀灭细菌繁殖体，但不能杀灭细菌芽胞。
（5）间歇灭菌法 反复多次利用流通蒸汽间歇加热以达到灭菌的目的。具体操作是将已经流通蒸汽消毒的物品放置于37℃孵箱过夜，使其中的芽胞发育成繁殖体，次日再用流通蒸汽加热，将繁殖体杀死。如此重复三次，可达到灭菌的效果。此法常用于不耐高温、富含营养的培养基的灭菌。
（二）辐射杀菌法
1.紫外线 波长范围在240～300 nm之间的紫外线具有杀菌作用，其中以265～266 nm的紫外线杀菌作用最强。紫外线可干扰细菌DNA的复制与转录，导致细菌发生变异或死亡。但由于紫外线穿透力较弱，普通玻璃、纸张、尘埃等均能阻挡紫外线，故紫外线一般用于病房、手术室、实验室等的空气消毒，以及物品表面的消毒。需要注意的是，紫外线对人的皮肤和眼睛有损伤作用，使用时应注意防护。
2.电离辐射 包括高速电子、X射线和γ射线等。电离辐射能破坏DNA结构，在剂量足够时，对各种微生物均有致死作用。电离辐射具有较高的能量和穿透力，且不会破坏物品的营养成分，故适用于一次性医用塑料制品、食品、药品和生物制品等的消毒。
（三）滤过除菌法
本法是用物理阻留的方法除去液体或空气中的微生物，以达到无菌的目的。主要适用于一些不耐高温的血清、抗毒素、抗生素及药液等的除菌。此法所用的器具是一种带有滤孔装置的滤菌器，它只允许液体或气体通过，大于孔径的微生物颗粒不能通过。滤菌器的种类很多，常用的有薄膜滤菌器、玻璃滤菌器、石棉滤菌器等。