三、微生物学检查

三、微生物学检查

（一）分离与鉴定

1.标本采集　根据伤寒病程采取不同标本，通常在第1～2周取血液，第2～3周取粪便或尿液。急性肠炎者取吐泻物和剩余食物。败血症者取血液进行培养。

2.分离培养与鉴定　血液应先接种于胆汁肉汤增菌；粪便和经离心的尿沉渣可直接接种于肠道杆菌选择性培养基。37℃经18～24 h培养后，挑选无色半透明的不发酵乳糖的菌落涂片、染色、镜检，并接种于双糖铁或三糖铁培养基。疑为沙门菌时，进行生化反应和玻片凝集试验鉴定。

3.快速诊断法　近年来应用葡萄球菌A蛋白协同凝集试验、酶联免疫吸附试验、放射免疫测定等方法，检测患者血清或尿液中伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌的可溶性抗原，协助临床早期诊断肠热症。

（二）血清学试验

常用肥达试验。即用已知的伤寒沙门菌O抗原、H抗原和甲型副伤寒沙门菌的H抗原、肖氏沙门菌的H抗原与待检血做定量凝集试验。根据抗体含量多少及其增长情况，辅助临床诊断肠热症。肠热症常由伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌和肖氏沙门菌引起，故通常采用上述三种菌的抗原进行试验。有的地区可由希氏沙门菌引起，应增添希氏沙门菌H抗原进行试验。

本试验在肠热症患者病程第1周末时，即可出现阳性结果。判定结果时必须考虑下述情况。

1.正常抗体水平　正常人因隐性感染或预防接种，血清中可含有一定量抗体，其效价随各地区情况而不同。一般说来，O凝集效价≥1∶80、H凝集效价≥1∶160时才有诊断价值。(https://www.daowen.com)

2.动态观察　判断肥达试验结果须结合临床症状、病期等。单次凝集效价增高，有时不能定论。如间隔数天重复采用，凝集效价随病程延长而逐渐上升4倍以上，有诊断意义。

3.O抗体与H抗体在诊断上的意义　患肠热症后，O抗体与H抗体在体内的消长情况不同。IgM型O抗体出现较早，持续时间仅半年左右，消失后不易受伤寒、甲型副伤寒沙门菌以外细菌的非特异性抗原刺激而重新出现。IgG型H抗体出现较晚，维持时间可长达数年，消失后易受非特异性抗原刺激而短暂地重新出现。因此，可考虑以下情况：①若H、O凝集效价均超过正常值，则感染伤寒、甲型副伤寒沙门菌的可能性大；②若H与O凝集效价均低，则患肠热症的可能性甚小；③若H凝集效价高而O凝集效价不高，可能系预防接种或非特异性回忆反应；④如O凝集效价高而H凝集效价不高，可能是感染早期或其他沙门菌感染（肠炎沙门菌与伤寒沙门菌有共同O抗原）引起的交叉反应。

4.其他　少数病例在整个病程中，肥达试验始终呈阴性。可能原因如下：①发病早期曾用大量或多种抗生素治疗；②患者免疫功能低下。故本试验阴性时，不宜匆忙地否定诊断。

伤寒患者不同病期血液、粪便、尿液中病原菌与特异性凝集素的阳性检出率，如图9-1所示。

（三）伤寒带菌者的检查

最可靠的方法是分离培养病原菌，但检出率不高。一般可先检测可疑血清中有无Vi抗体，当凝集效价≥1∶10时，再取粪便或尿液多次分离培养，才能确定。

图9-1　伤寒病程中各种试验阳性率