微生物学检查法

1.标本采集　从感染部位中心处采集标本，避免正常菌群的污染。样本多为无菌切取或活检的组织标本、感染深部吸取的渗出物或脓液。采集标本后立即放入厌氧标本瓶中，并迅速送检。

2.直接涂片镜检　将标本直接涂片、革兰染色后观察细菌形态、染色性及菌量。(https://www.daowen.com)

3.分离培养与鉴定　标本应在无氧条件下接种于含有还原剂的培养基中，常用牛心脑浸液血琼脂平板，37℃无氧培养2～3天，观察细菌生长情况，若无细菌生长再培养至1周后观察。挑取菌落转接2块血琼脂平板，分别置于有氧和无氧条件下培养。若细菌在两块平板中均能生长，则该菌是兼性厌氧菌；若只在无氧环境中生长，则为专性厌氧菌。分离纯化后，再利用生理生化反应继续鉴定。该法是证实无芽胞厌氧菌感染的关键方法。

4.其他釜定方法　利用气相色谱法（GC）检测细菌代谢终产物进行菌种鉴定。需氧菌和兼性厌氧菌只产乙酸，若检测出其他短链脂肪酸，如丁酸、丙酸，则提示该菌为厌氧菌。利用核酸杂交、PCR等分子生物学方法，可快速检测出标本中是否含无芽胞厌氧菌。