微生物学检查法

三、微生物学检查法

（一）标本采集

1.HIV感染早期　可采集患者的血液、脑脊液和骨髓细胞，从中分离病毒，从血液中能查到HIV抗原。

2.无症状潜伏期　此期内一般很少从外周血中检测到HIV抗原。

3.AIDS期　可采集外周血，能检测到HIV抗原、核酸及抗体。

（二）病毒分离培养

用于病毒分离培养的标本可为患者的单个核细胞、骨髓细胞、血浆或脑脊液等。敏感的细胞株有人外周血淋巴细胞、脐血淋巴细胞等。(https://www.daowen.com)

（三）检测抗体

抗体检测是目前最常用的诊断方法。主要方法有ELISA、乳胶凝集试验、IFA和免疫印迹试验（Western blot，WB）等。其中ELISA是最常用的HIV抗体的初筛试验。检测阳性者必须进行确诊试验，最常用的确诊试验为WB，即用已知的HIV p24、gp41和gp160/120重组蛋白等作为抗原，检测特异性抗体。若血清中同时检出两种或两种以上抗体，可确诊为HIV感染。一般感染后6～12周可检出抗体，6个月后所有感染者均可检出抗体。

（四）检测病毒抗原

常用ELISA法检测HIV的p24抗原，急性感染期可检出血液中的p24抗原，但抗体出现后通常不能检出。到AIDS期，p24抗原检测又可呈阳性。

（五）检测病毒核酸

常用的方法有RT-PCR、定量RT-PCR和核酸杂交等。RT-PCR用于血液标本中HIV RNA的检测，也可用于新生儿HIV感染的早期诊断。定量RT-PCR常用于监测HIV感染者病情的发展和评价抗HIV药物治疗效果。