弓形虫感染与疾病
(一)弓形虫感染疾病的概述
弓形虫病是一种呈世界性分布且严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,其病原体刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)可寄生在除红细胞外的几乎所有有核细胞内。猫科动物是重要的传染源。弓形虫通过先天性和获得性两种途径感染人体。病原学检查包括涂片染色、动物接种分离及细胞培养,具有确诊意义。血清学检测即抗体及抗原检测是目前弓形虫感染诊断的主要方法。PCR的应用价值还有待评估。
(二)弓形虫感染的病因
由刚地弓形虫所引起,呈全球流行。特殊人群如肿瘤患者、免疫抑制或免疫缺陷患者、先天性缺陷婴幼儿感染率较高。
(三)弓形虫感染的临床表现
一般分为先天性和后天获得性两类,均以隐性感染为多见。临床症状多由新近急性感染或潜在病灶活化所致。

图10-19 疟原虫感染的实验室检验流程
先天性弓形虫病的临床表现复杂。多数婴儿出生时可无症状,其中部分于出生后数月或数年发生视网膜脉络膜炎、斜视、失明、癫痫、精神症状或智力迟钝等。下列不同组合的临床表现:视网膜脉络膜炎、脑积水、小头畸形、无脑儿、颅内钙化等应考虑本病可能。
后天获得性弓形虫病病情轻重不一,免疫功能正常的宿主急性淋巴结炎最为多见,约占90%。免疫缺损者如艾滋病患者、器官移植患者、恶性肿瘤(主要为霍杰金病等)患者常有显著全身症状,如高热、斑丘疹、肌痛、关节痛、头痛、呕吐、谵妄,并发生脑炎、心肌炎、肺炎、肝炎、胃肠炎等。
眼弓形虫病多数为先天性,后天所见者可能为先天潜在病灶活化所致。临床上有视力模糊、盲点、怕光、疼痛、泪溢、中心性视力缺失等,很少有全身症状。炎症消退后视力改善,但常不完全恢复,可有玻璃体混浊。
(四)弓形虫感染的实验室检查
1.病原学检查
将可疑病畜或死亡动物的组织或体液,做涂片、压片或切片,甲醛固定后,做瑞氏或姬氏染色镜检可找到弓形虫滋养体或包囊。
2.用PCR方法检测特异性核酸
3.血清学诊断
间接荧光抗体试验、间接血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验和补体结合试验检测特异性IgM、IgG、IgA抗体或血清循环抗原。
(五)结果分析(https://www.daowen.com)
1.涂片染色与镜检
姬氏染色镜检,查见滋养体为阳性。滋养体呈弓形或月牙形,一端较尖,一端钝圆;一边扁平,另一边较膨隆。虫体长4~7 μm,最宽处2~4 μm,细胞质呈蓝色,胞核紫红色,位于虫体中央。组织印片有时可查见弓形虫包囊。包囊呈圆形或椭圆形,直径5~100 μm,有一层富有弹性的坚韧囊壁,内含数个至数百个滋养体。
2.动物接种分离或细胞培养
将病人的体液或组织接种小鼠腹腔或组织培养细胞。实验动物需观察4~6周。姬氏染色可观察到虫体。应用免疫荧光可提高检测的敏感性。细胞培养和动物接种对于先天性弓形虫病的诊断有帮助,前者较后者费时少。
3.抗体检测
IgM的检测有助于弓形虫病的早期诊断;IgG抗体在感染后2~4个月达到高峰,持续时间较长,结果见表10-20。IgA抗体也是弓形虫感染早期的一个重要标志物。
4.抗原检测
从血清或体液内直接检测弓形虫抗原成分有助于对急性弓形虫病的诊断。ELISA是应用最多的检测方法。
5.分子生物学诊断(PCR方法)
弓形体B1基因是目前PCR检测弓形虫感染应用最广泛的靶基因。
弓形虫病实验室分析路径见图10-20、图10-21,结果及解释见表10-2。

图10-20 弓形虫病实验室分析路径

图10-21 弓形虫病血清学诊断路径
表10-2 弓形虫抗体检测结果
