三、附加体型载体(YEp)
YEp型载体是一种罕见的真核细胞质粒载体,一般由大肠杆菌质粒、2μm质粒以及酵母染色体的选择标记构成。利用2μm质粒,人们已经构建出许多YEp型载体。图6-9所示为YEp24载体的结构与物理图谱,它是由酵母的2μm质粒、pBR322质粒和酵母的URA3基因等构成的。YEp型载体对酵母具有很高的转化活性,一般为103~105转化子/μgDNA。其比YRp型质粒更稳定,拷贝数也高(25~100个/细胞),是基因克隆中的常用载体。

图6-9 YEp24载体的物理图谱
由上可以看出,在使用酵母中的克隆载体时都存在着稳定性与拷贝数之间的矛盾。能稳定遗传的(YIp、YCp)都是单拷贝,而拷贝数高的(YRp、YEp)又都不稳定。因此在基因操作中,要根据不同的使用目的进行选择和改造载体。