二、病原学

(一)分类分型

1954年首次从病猪分离出1株α溶血性链球菌,1966年建议命名为猪链球菌,1968年鉴定为荚膜2型猪链球菌。猪链球菌在分类学上属细菌域,厚壁菌门,芽胞杆菌纲,乳杆菌目,链球菌科,链球菌属。根据猪链球菌荚膜多糖抗原的不同,猪链球菌至少有35种血清型(1～34型,1/2型),有些血清型可引起猪发病,也可导致人发病。其中1、2、7、9型菌株最重要,尤其2型毒力最强,且经常从病人及病猪中分离出来。9型从许多欧洲国家的病猪检测出。

(二)形态特征

猪链球菌多数为圆形或椭圆形,单球或双球,少数呈短链状,在血液和肉汤培养物中可见呈长链状。该菌为革兰阳性球菌,大小0.8～1μm,无芽胞,有荚膜。在血平板上生长呈细小菌落,无色,半透明,直径0.5～1 mm,边缘整齐,凸起,光滑。根据溶血情况分类,猪链球菌在羊血平皿上表现为α溶血,而在马血平皿上表现为β溶血。适宜的培养基为血培养瓶及血平皿,培养温度37℃、时间18～20小时。该菌革兰染色结果有时不稳定,需氧或兼性厌氧。新分离的猪链球菌,形态较典型,链长可达20多个菌体;二代培养后细菌形态不典型,甚至变为革兰阴性球杆菌,不成链。因此,在诊断、研究时,对刚分离到的细菌形态进行观察十分重要。

(三)病原理化特征及抵抗力(https://www.daowen.com)

猪链球菌对环境理化因素的抵抗力差,对常见消毒剂都敏感。猪链球菌血清2型常污染环境,在4℃冷藏的生肉中可存活42天,常温下可在粪便中存活8天,在灰尘中生存不超过24小时,在50℃水中能存活2小时,在60℃水中能存活10分钟,在煮沸水中立即死亡。农场或饲养场常用的消毒剂和清洁剂均可使其失活。

(四)病原毒力因子

猪链球菌的毒力菌株具有很强的侵袭性,其能穿透宿主黏膜屏障,到达血液系统并存活,最后侵入脾、肝、肾、肺、心脏等多种器官,引起相应的疾病;且其也能穿透血-脑屏障,进入中枢神经系统,引起脑膜炎等疾病。猪链球菌主要毒力因子包括荚膜多糖(capsular polysaccharide,CPS)、毒力相关蛋白如溶菌酶释放相关蛋白(muraminidase-released protein,MRP)和细胞外蛋白因子(extracellular factor,EF)、溶菌素(suilysin,SLY)以及黏附素(adhesins)。

CPS被公认为主要毒力因子,SLY可引起机体血小板和淋巴细胞损伤,最终破坏机体凝血和免疫系统,导致血管内皮损伤、贫血、血小板减少。MRP也称细胞壁相关蛋白,能够逃避吞噬细胞的吞噬,可选择性地在宿主上皮细胞繁殖。EF是菌体外分泌蛋白,仅能从培养物上清澈分离,有研究表明,在病猪中分离的致病型菌株均含有MRP和EF,而非致病性菌株则缺失MRP和EF。有学者对不同SS2型菌株的MRP基因型进行了细化研究,通过“内标”化的斑马鱼感染模型和实时荧光定量PCR,分别测定不同MRP基因型菌株的毒力水平和转录水平。发现MRP基因在SS2型菌株分布广泛,但不同菌株中MRP基因型不同,MRP-A型菌株的致病力更强,而且可以通过MRP非保守区域作为诊断靶点有效鉴定SS2型强毒株。