诊断与鉴别诊断
根据病例的流行病学史、临床表现和实验室检测结果,排除其他明确病因后即可诊断。
(一)流行病学史
当地一般有猪等家畜疫情,病例发病前7天内有与病(死)猪等家畜的接触史,如宰杀、洗切、销售等。
(二)临床表现
急性起病,有畏寒、发热等全身感染中毒症状。伴有TSS或SMS表现,或同时存在TSS和SMS表现。
(三)实验室检测
1.血常规化验 白细胞计数升高(严重病人发病初期白细胞可降低或正常),中性粒细胞比例升高。
2.病原的分离和鉴定
(1)分离步骤和程序:可采集病人的血、腹水、脑脊液或尸检标本,病猪及死猪的肝脏、脾脏、腹水、心血等,4℃保存。制作肝脏、脾脏压片,或用腹水、血液、脑脊液涂片,火焰固定后进行革兰染色,油镜下观察是否有成对或短链状革兰阳性球菌。取有成对或短链状革兰阳性球菌的标本接种选择性增菌培养液(含15μg/ml多黏菌素B,30 g/ml萘啶酮酸的脑心培养基),或直接划线接种含该两种抗生素的羊血琼脂平板培养基,在蜡烛缸或C02培养箱中培养。
(2)血清学检测:用兰氏分型乳胶凝集链球菌试剂盒进行分群,用猪链球菌1～34个型血清进行分型。(https://www.daowen.com)
(3)生化反应:可用API生化鉴定系统的api-strep手工鉴定条进行鉴定,该法可直接鉴定到种。普通实验室可重点做VP试验、七叶苷水解试验、6.5%NaCl生长试验、45℃和10℃生长试验、胆汁耐受(麦康凯培养基)试验等。如结果依次为阴性、阳性、阴性、阴性、阴性、阴性,可初步认为猪链球菌,可送交到有条件的单位做进一步鉴定。
(4)基因鉴定(包括使用PCR技术和对PCR产物进行序列分析):挑取分离纯化的菌落或选择平板上湿润的可疑菌落,利用特异引物扩增猪链球菌种特异性16S rRNA、猪链球菌荚膜多糖基因(cps2A)、溶菌酶释放相关蛋白编码基因片段(mrp)等,也可进一步将PCR产物测序进行分析。此法不需进行细菌的分离培养,即可用于猪链球菌血清2型的快速诊断及流行病学调查,特异性强。
3.诊断标准
(1)疑似病例:流行病学史结合急起畏寒、发热,外周血白细胞计数升高,中性粒细胞比例升高。
(2)临床诊断病例:流行病学史结合中毒性休克综合征和(或)脑膜炎。
(3)确诊病例:全血或尸检标本等无菌部位的标本纯培养后,经鉴定为猪链球菌。
4.主要鉴别诊断 本病应与其他可致发热、瘀点、瘀斑、休克、多器官功能损害等表现的疾病相鉴别,尤其应注意与下列疾病相鉴别:
(1)其他链球菌TSS:A组链球菌以及所产生的链球菌致热外毒素(streptococcal pyrogenic exotoxins,SPE),如SPE-A、SPE-C、SPE-F等可导致严重TSS,B组链球菌、C组链球菌、G组链球菌以及草绿色链球菌中的缓症链球菌感染也均可引起TSS。结合病人发病前7天内无病猪或死猪等家畜直接接触史,可与人感染猪链球菌病相鉴别,PCR或免疫学方法检测SPE-A等有助于诊断;感染部位标本或血培养鉴定为A组链球菌或其他链球菌即可鉴别。
(2)葡萄球菌TSS(staphy TSS):是由金黄色葡萄球菌产生的中毒性休克综合征毒素-Ⅰ(TSST-Ⅰ)和肠毒素引起、与人感染猪链球菌病临床表现相似的TSS,分为月经相关性TSS(mTSS)和非月经相关性TSS(nmTSS)两种类型。年轻妇女、有阴道月经塞使用史、月经期突然发病等有助于m TSS诊断;TSS继发于局灶性感染、外伤、侵入性诊疗操作后,应注意nmTSS的可能性。临床标本培养分离出金黄色葡萄球菌,或特异性TSST-I或肠毒素A、B、C、D、G等阳性结果即可鉴别。
(3)其他疾病:还应注意与其他革兰阳性细菌败血症、感染性休克、暴发型流行性脑脊髓膜炎、肾综合征出血热(HFRS)及全身炎症反应综合征(SIRS)等疾病相鉴别。后期应注意排除其他严重感染所致的多器官功能损害综合征(MODS)或多器官功能衰竭(MOF)。