二、病原学

(一)分类分型

MRSA属革兰阳性、溶血性、兼性厌氧菌,作为一种金黄色葡萄球菌,该菌属于微球菌科的葡萄球菌属。MRSA菌株的分型法有表型和基因型两类:医院感染中常用的细菌分型,血清型、噬菌体分型、抗菌谱型等传统的分型方法均属于表型法;另一类是目前广泛应用的基因分型法,包括质粒指纹图谱技术分型方法、脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分型技术、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术、多位点可变数量串联重复序列分析(multiple-locus variable number tandem repeat analysis,MLVA)分型技术、SPA基因多态性分型法及葡萄球菌染色体mec盒(staphylococcal cassette chromosome mec,SCCmec)分型等,对于追踪传染源、感染控制、研究型别与感染种类和耐药性的关系有重要意义。

(二)形态特征

该菌外表呈球形,直径约1μm,显微镜下排列成葡萄串状。细菌培养平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径0.5～1.0 mm,血琼脂平板上菌落周围形成透明的β-溶血环,典型的菌落呈现金黄色,因此命名为金黄色葡萄球菌。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰染色呈阳性。

它可在15～45℃生长,并可在15%的NaCl溶液中生长。MRSA一般生长缓慢,但是在30℃、培养基p H 7.0及高渗(40 g/L NaCl溶液)条件下生长较快。30℃时,不均一耐药株(MRSA菌落内细菌存在敏感和耐药两个亚群,使用抗生素后敏感菌被杀死,而耐药菌则缓慢生长。)表现为均一耐药和高度耐药,在37℃又恢复不均一耐药。均一耐药株在＞37℃或p H小于5.2时,均一耐药性可被抑制而表现为敏感。

(三)理化特征及抵抗力

金黄色葡萄球菌对热和干燥的抵抗力较一般无芽胞细菌强,加热80℃30分钟才被杀死。在干燥的脓汁、痰液中可存活2～3月。5%石炭酸中10～15分钟死亡。对碱性染料敏感,十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。(https://www.daowen.com)

(四)耐药特征及机理

MRSA具有广谱耐药性,除对甲氧西林耐药外,对其他所有β内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氟喹诺酮类、磺胺类、利福平类等均有不同程度耐药,唯对万古霉素(糖肽类抗生素)及利奈唑胺敏感。其耐药机制复杂,主要包括下述4种途径导致耐药。

1.药物作用靶位的改变　主要指的是由mecA基因介导的固有耐药,也是MRSA耐药的主要机制。该基因编码的青霉素结合蛋白2(PBP2a)使细菌与β内酰胺类抗生素的结合力极低,从而产生耐药。Van A基因介导的耐药则改变了糖肽类抗生素的作用靶位,从到导致对该类抗生素的高度耐药。

2.药物灭活酶的产生　MRSA可产生β内酰胺酶、MSL(红霉素类)灭活酶/钝化酶及氨基糖苷类灭活酶,从而对相应抗生素产生耐药。

3.细胞壁通透性改变　MRSA的肽聚糖合成增多,导致细胞壁增厚,阻止糖肽类药物进入细胞,从而对此类药物产生低水平耐药。

4.主动外排泵的作用　MRSA的天然外排泵系统高表达,将进入细菌体内的抗菌药物主动排出体外,降低抗菌药物在菌体内的浓度,导致多重耐药。