二、病原学
(一)分类分型
嗜吞噬细胞无形体属于立克次体目、无形体科、无形体属(Anaplasma)。无形体科是一类主要感染白细胞的专性细胞内寄生革兰阴性小球杆菌,其中对人致病的病原体主要包括无形体属的嗜吞噬细胞无形体、埃立克体属(Ehrlichia)的查菲埃立克体(E.chaffeensis)和伊文埃立克体(E.ewingii)、新立克次体属(Neorickettsia)的腺热新立克次体(N.sennetsu),分别引起人粒细胞无形体病、人单核细胞埃立克体病(human monocytic ehrlichiosis,HME)、伊氏埃里克体病、腺热新立克次体病(图5-4-1)。
图5-4-1 立克次体分类及对人类致病的重要属群
20世纪90年代初期,美国在多例急性发热病人的中性粒细胞胞质内发现埃立克体样包涵体。1995年,Goodman等从病人的血标本分离到该种嗜粒细胞病原体,将它非正式命名为人粒细胞埃立克体,其所致疾病称为人粒细胞埃立克体病。后经16S rRNA基因序列的系统发育分析,发现该种嗜粒细胞病原体与无形体属最相关,因此,将其归于无形体属的一个新种,命名为嗜吞噬细胞无形体,其所致疾病也改称为人粒细胞无形体病。
(二)形态特征
嗜吞噬细胞无形体呈球状多型性,革兰染色阴性,主要寄生在粒细胞的胞质空泡内,以膜包裹的包涵体形式繁殖。用Giemsa法染色,嗜吞噬细胞无形体包涵体在胞质内染成紫色,呈桑葚状(图5-4-2)。
嗜吞噬细胞无形体为专性细胞内寄生菌,缺乏经典糖代谢途径,依赖宿主酶系统进行代谢及生长繁殖,主要侵染人中性粒细胞。嗜吞噬细胞无形体的体外分离培养使用人粒细胞白血病细胞系(HL-60),主要存在于HL-60细胞内与膜结构相连的空泡内,生长繁殖迅速。其感染的空泡内无查菲埃立克体感染所形成的纤维样结构。嗜吞噬细胞无形体早期的形态多为圆形、密度较大的网状体,后期菌体变小且密度增大。嗜吞噬细胞无形体的外膜比查菲埃立克体外膜有更多的皱折(图5-4-3)。(https://www.daowen.com)
图5-4-2 人血液中性粒细胞内无形体包涵体(×-1000,JSDumler)
图5-4-3 电子显微镜下的无形体包涵体(×21960,JSDumler)
遗传及表型特征:嗜吞噬细胞无形体的基因组为1 471 282个碱基对,G+C含量为41.6%,含有1 369个编码框(ORF)。特征性基因为msp 2以及Ank A基因,100%的菌株具有msp2,70%的菌株具有Ank A基因。
中国疾病预防控制中心传染病所与5家临床医院合作开展了无形体病原分离科研合作,成功分离到我国人源、蜱源无形体分离株并对重要毒力因子进行了分子遗传学初步研究。我国无形体分离株msp2膜蛋白基因和ank A调控干扰蛋白基因无论核酸序列还是其表达产物的氨基酸序列与美国本土分离株Webster和HZ株均有较大变异。同样,我国啮齿动物及患病绵羊分离株与美国分离株也存在较大的遗传变异。我国无形体病原体遗传变异与其传播媒介及动物宿主的多样性是否具有一定的相关性还有待进一步深入研究。
(三)理化特征及抵抗力
嗜吞噬细胞无形体对环境的抵抗力与立克次体相似。在人抗凝全血中,嗜吞噬细胞无形体可以存活11天;在冷藏的血液中保存18天仍具有感染力,存在经输血传播的可能。在4～6℃条件下,嗜吞噬细胞无形体在细胞培养基中可存活21天。对低温及干燥的抵抗力强,-20℃可长期保存。室温放置数小时即失去活力,56℃30分钟可灭活。对紫外线和一般的消毒剂敏感。对四环素类抗生素均敏感。