诊断与鉴别诊断
依据流行病学史、临床表现和实验室检测结果进行诊断。但是,人粒细胞无形体病早期症状和体征没有特异性,和病毒性疾病相似。
(一)流行病学史
(1)发病前2周内有被蜱叮咬史。
(3)直接接触过危重病人的血液等体液。
蜱虫叮咬通常是无痛的,大约有一半的无形体病病人不记得有被蜱虫咬伤。
(二)临床表现
急性起病,主要症状为发热(多为持续性高热,可高达40℃以上)、全身不适、乏力、头痛、肌肉酸痛,以及恶心、呕吐、厌食、腹泻等。个别重症病例可出现皮肤瘀斑、出血,伴多脏器损伤、弥漫性血管内凝血等。
(三)实验室检测
标本灭活、病原DNA标本提取及病原体分离操作应在生物安全Ⅱ级实验室进行。
1.血常规及生化检查
(1)早期外周血象白细胞、血小板降低,严重者呈进行性减少,异型淋巴细胞增多。
(2)末梢血涂片镜检中性粒细胞内可见桑葚状包涵体。
在HGA病人的感染早期,外周血涂片进行Romanowsky染色后镜检,可见中性粒细胞的胞质内有圆形的深紫色的“桑葚状”包涵体。包涵体中含有数量不等的病原体,菌体平均长度为0.5～1.5μm,呈球形、卵圆形、梭标形等,多个菌体成串位于胞质靠近细胞膜的部位成簇排列。该法是目前从可疑的病人中筛选HGA病人的一种最快速、最简便的有效方法,但由于外周血嗜粒细胞无形体数量较少而容易造成假阴性。
(3)谷丙转氨酶(丙氨酸氨基转移酶,ALT)和(或)谷草转氨酶(天冬氨酸氨基转移酶,AST)升高。
2.血清及病原学检测
(1)急性期血清间接免疫荧光抗体(IFA)检测嗜吞噬细胞无形体IgM抗体阳性。(https://www.daowen.com)
(2)急性期血清IFA检测嗜吞噬细胞无形体IgG抗体阳性。
(3)恢复期血清IFA检测嗜吞噬细胞无形体IgG抗体滴度较急性期有4倍及以上升高。
采集急性期(发热初期,一般发病1周内)与恢复期(至少间隔2～3周)双份血清。如恢复期血清抗体检测阴性,建议采集第3份血液样本(间隔2～4周)。如果同时检测双份血清,IgG抗体4倍升高,则结果强烈支持嗜吞噬细胞无形体感染。如果急性期抗体升高,而恢复期没有升高或轻微升高,则应采集第3份血液样本(间隔2～4周)进行进一步检测。
(4)全血或血细胞标本PCR检测嗜吞噬细胞无形体特异性核酸阳性,且序列分析证实与嗜吞噬细胞无形体的同源性达99%以上。
由于感染早期的血样本中人粒细胞无形体量较少,普通PCR法不敏感。实时荧光定量PCR法是一种快速检测病原体的高特异性和高敏感性技术。
(5)分离到病原体。人粒细胞无形体的体外培养较难,尤难以建立稳定的体外培养体系,部分实验室采用白血病HL-60细胞系或采用C3H/HeJ鼠腹腔注射病人血液进行病原体分离。接种约7天后,取培养细胞或小鼠的血和脾脏做PCR检测嗜粒细胞无形体DNA,或用特异性抗体作免疫组织化学染色检测细胞和组织内的无形体。嗜粒细胞无形体分离是确诊HGA的金标准,但是无论细胞培养还是动物实验分离的方法均复杂而耗时,且成功率不高,难以在临床常规中应用。
(四)诊断标准
疑似病例:具有上述(一)(二)和(三)项1项中的(1)(3)。部分病例可能无法获得明确的流行病学史。
临床诊断病例:疑似病例同时具备(三)项1项中的(2),或(三)项2项中的(1)或(2)。
确诊病例:疑似病例或临床诊断病例同时具备(三)项2项中(3)(4)(5)中的任一项。
(五)主要鉴别诊断
1.与其他蜱传疾病、立克次体病的鉴别 人单核细胞埃立克体病(HME)、斑疹伤寒、恙虫病、斑点热以及莱姆病等。
2.与发热、出血及酶学指标升高的感染性疾病的鉴别 主要是病毒性出血性疾病,如流行性出血热、登革热等。
3.与发热、血白细胞、血小板降低的胃肠道疾病的鉴别 伤寒、急性胃肠炎、病毒性肝炎。
4.与发热及血白细胞、血小板降低或有出血倾向的内科疾病的鉴别 主要是血液系统疾病,如血小板减少性紫癜,粒细胞减少、骨髓异常增生综合征。可通过骨髓穿刺及相应病原体检测进行鉴别。
5.与发热伴多项酶学指标升高的内科疾病鉴别 主要是免疫系统疾病,如皮肌炎、系统性红斑狼疮、风湿热。可通过自身抗体等免疫学指标进行鉴别。
6.其他 如支原体感染、钩端螺旋体病、鼠咬热、药物反应等。