枸杞子浸膏中甜菜碱的含量测定
1.仪器、试药及药材仪器 CS-9000双波长薄层扫描仪（日本岛津）。定量毛细管（美国杜邦公司）。硅胶：G预制板（青岛海洋化工厂）。试剂：盐酸甜菜碱对照品（中国药品生物制品检定所）。试剂均为分析纯。药材枸杞子为茄科植物宁夏枸杞LyciumbarbarumL.的干燥成熟果实，由北京中医药大学中药学院鉴定教研室闫玉凝老师鉴定。
2.浸膏制备 甜菜碱是季胺类生物碱，极易溶于水，溶于乙醇。因此，我们设计了水提和醇提2类提取方法。但枸杞子经这两类提取方法提取后出膏率较高，且甜菜碱易潮解，枸杞子浸膏不易干燥。为了克服枸杞子出膏率高这一问题，我们根据石硫法原理，在这两类提取方法中又各分成了几种方法。同时测定了各种方法中甜菜碱的含量并进行对比研究，以寻找一种既保留有效成分甜菜碱的含量，又较大地降低枸杞子出膏率的较佳提取工艺。
浸膏A取枸杞子250g，用水煎煮3次。加水量分别为6、5、4倍，煮沸时间分别为1、1、0.5小时，放冷后合并滤液，中速滤纸过滤，得滤液，减压浓缩到稠膏，再减压干燥即得浸膏A（157g）。
浸膏B取枸杞子250g，用水煎煮2次（方法同浸膏A），放冷后合并滤液，减压浓缩至与原药材比为1∶1，用石灰粉调pH12，然后加入95%乙醇调至含醇量为80%，静置12小时以上，中速滤纸过滤得滤液，减压浓缩至稠膏，再减压干燥即得浸膏B（94g）。
浸膏C取枸杞子250g，用水煎煮3次（方法同浸膏A），用石灰粉调pH12，然后加入2mol/LH2SO4调pH6，静置12小时以上，中速滤纸过滤，得滤液，减压浓缩至稠膏，再减压干燥即得浸膏C（155g）。
浸膏D取枸杞子250g，用95%乙醇回流提取3次，放冷后合并滤液，中速滤纸过滤，得滤液，减压浓缩至稠膏，再减压干燥即得浸膏D（107g）。
浸膏E取枸杞子250g，用95%乙醇回流提取3次，合并滤液，减压浓缩至与原药材比为1∶1，用石灰粉调pH7，静止12小时以上，中速滤纸过滤，得滤液，减压浓缩至稠膏，再减压干燥即得浸膏E（92g）。
浸膏F取枸杞子250g，用95%乙醇回流提取3次，合并滤液，减压浓缩至与原药材比为1∶1，用过量石灰粉调pH7～8，静止12小时以上，中速滤纸过滤，得滤液，减压浓缩至稠膏，再减压干燥即得浸膏F（20g）。
浸膏G取枸杞子250g，用95%乙醇回流提取3次，合并滤液，减压浓缩至与原药材比1∶1，用石灰粉调pH7，再用2mol/LH2SO4调pH6，静止12小时以上，中速滤纸过滤，得滤液，减压浓缩至稠膏，再减压干燥即得浸膏G（80g）。
3.浸膏中甜菜碱含量测定
（1）溶液配制 标准品溶液精密称取在105℃干燥至恒重的盐酸甜菜碱对照品19.91mg，加乙醇溶解并定容至5mL。供试品溶液取浸膏A至浸膏G1.00g，加入蒸馏水20mL，用盐酸调pH1，加入活性炭1.0，煮沸，冷却后过滤，滤液加入新鲜配制的2%雷氏盐溶液20mL，搅拌，放于冰箱3小时。用G4垂熔玻璃漏斗过滤，沉淀用少量冰水洗涤后，加入丙酮溶解，定容至10mL。
（2）层层析 薄层板为硅胶G预制板（20cm×20cm），使用前放入烘箱中105℃活化1小时，置干燥器中备用。展开剂为丙酮-无水乙醇-盐酸（10∶6∶1）。显色剂为改良碘化铋钾试剂。精密吸取各样品供试品液5μL，标准品溶液2μL和5μL点于同一薄层板上，上行展开约10cm，取出，挥干溶剂，喷雾显色。甜菜碱Rf值约为0.48，显桔红色斑点，样品中甜菜碱斑点与其他成分的斑点得到很好的分离。
（3）薄层扫描 λR=600nm，λS=510nm，反射式踞齿扫描，SX=3，狭缝1.2mm×1.2mm，灵敏度×1。
（4）稳定性试验 甜菜碱在薄层板上显色后放置0.5、1.0、1.5、2.0小时测定，结果基本稳定。2.5小时小时以后测定，峰面积积分值呈下降趋势。测定结果表明，甜菜碱斑点显色后2小时内基本稳定。
（5）精密度试验 在同一块薄层板上点相同的甜菜碱斑点，展开显色后立即扫描测定，RSD=0.96%（n=6）。
（6）标准曲线绘制 精密吸取甜菜碱标准品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0μL点于同一薄层板上，展开显色后立即扫描测定，经计算，得回归方程Y=19941.52X+27113.02，r=0.9982（n=6）。
（7）样品测定 精密吸取样品液5μL点于薄层板上，并随行标准品溶液2μL和5μL交叉点样，展开显色后立即扫描测定，计算各样品中甜菜碱的含量。
（8）回收率试验 由于浸膏A至浸膏G样品供试液测定甜菜碱含量的处理方法相同，我们取浸膏A为代表，做回收率试验。方法取1.0g样品4份，其中3份分别加入精密称定的甜菜碱标准品25.52、30.12、38.70mg。按供试品溶液项下方法制成样品液，再按样品测定项下方法操作，测得甜菜碱回收率为96.70%，RSD=1.74%（n=3）。