二、血清学试验
细菌血清学反应是指相应的抗原与抗体在体外一定条件下作用，可出现肉眼可见的沉淀、凝集现象。可以用标准血清检测待检细菌，也可以用标准菌株制备的抗原检测血清中的抗体。按操作方法不同，可将其分为玻片凝集试验、试管凝集试验两种。
1.玻片凝集试验
是一种常规的定性试验方法。
（1）原理：用已知诊断血清与待检细菌混合，出现肉眼可见的凝集颗粒，常用于鉴定细菌血清型。
（2）方法：在洁净载玻片上滴1～2 滴血清或15µl 血清，然后取少量被检细菌与血清混匀，轻轻摇动玻片，1～2min 后观察结果。以生理盐水作对照。
（3）结果观察：1～2min 内混合悬液由均匀混浊变为澄清透明并出现大小不等的乳白色凝集颗粒，为凝集反应阳性；如果呈均匀混浊，为凝集反应阴性（图2-3-6）。
图2-3-6 玻片凝集试验
左侧：凝集；右侧：空白对照
（4）注意事项
① 实验过程必须无菌操作，接种环必须作灭菌处理，结果观察后将载玻片放入盛有消毒液的指定容器内，切忌任意存放或冲洗。
② 被检细菌应纯培养，不能混有杂菌，以免影响结果。
③ 挑取细菌培养物不宜过多，与诊断血清混合时必须将细菌涂均匀，但不宜涂得太宽，以免很快干涸而影响结果观察。
④ 诊断血清应保存于4℃冰箱中，不可冷冻。使用时应用无菌吸管或tip 头吸取血清，以免污染和造成效价降低。诊断血清应在有效期内使用。
⑤ 建议在具有生物安全防护的操作条件下进行，以防造成感染或污染。
⑥ 某些细菌（如具有Vi 抗原的菌株）菌体表面常有一层表面抗原，能阻止、抑制菌体抗原与诊断血清凝集，从而导致假阴性结果。此时，应将细菌悬液置于100℃中煮沸1h，以破坏其表面抗原，然后再进行玻片凝集试验。(https://www.daowen.com)
2.试管凝集试验
是一种半定量试验方法，可排除玻片凝集试验的非特异性凝集。
（1）原理：抗原与不同稀释度的抗体在试管内直接结合而出现的凝集现象。
（2）方法：将诊断血清用无菌生理盐水倍比稀释成不同浓度，然后加入等量菌悬液，36℃、16～20h 后观察结果。
（3）结果观察：血清最高稀释度仍有明显凝集现象（管内液体澄清，部分凝集块沉于管底），为该菌的凝集效价（图2-3-7）。
图2-3-7 试管凝集试验
左侧：凝集；右侧：阴性
（4）注意事项：观察结果前切勿摇动试管，以免凝集块分散而影响结果判定。
3.自凝现象
（1）方法：在洁净的玻片上加一滴生理盐水，将被检细菌培养物与生理盐水混合成均一的混浊悬液，将玻片轻轻摇动30～60s，在黑色背景下观察反应情况。
（2）结果观察：如菌体彼此相互凝集成明显或比较明显小颗粒状物，则被检细菌有自凝性；反之无自凝性。