六、纤溶活性检验
纤溶活性检验的筛检试验包括纤维蛋白原定量测定、血浆纤维蛋白（原）降解产物测定以及优球蛋白溶解时间（euglobulin lysis time，ELT）等的测定。确证试验包括血浆D-二聚体测定、血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（plasma protamine paracoagulation test，3P试验）、血浆纤溶酶原活性测定、血浆纤维蛋白肽即Bβ1～42和Bβ15～42（fibrin peptide Bβ1～42and Bβ15～42）等的测定。本节介绍纤维蛋白原定量测定、血浆纤维蛋白（原）降解产物测定及D-二聚体的测定。
（一）血浆纤维蛋白原定量测定
纤维蛋白原（Fg）由肝脏合成，是血浆浓度最高的凝血因子。纤维蛋白原浓度或功能异常均可导致凝血障碍。因此，纤维蛋白原是出血性疾病与血栓性疾病诊治中常用的筛检指标之一。纤维蛋白原检测方法有多种，包括凝血酶凝固时间法（Clauss法）、双缩脲比色法、比浊法、PT衍生纤维蛋白原测定法、RAI法和ELISA法等。有的准确性较差，已趋向淘汰。目前常用的方法有Clauss法、PT衍生法等。
1.检测原理
（1）凝血酶凝固时间法（Clauss法）：在受检血浆中加入凝血酶，使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白，血浆中纤维蛋白原的含量与血浆凝固的时间呈负相关。被检血浆的维蛋白原实际含量可从国际标准品纤维蛋白原参比血浆测定的标准曲线中获得。
（2）酶联免疫法：用抗纤维蛋白原的单克隆抗体、酶联辣根过氧化酶抗体显色、酶联免疫检测仪检测血浆中的纤维蛋白原含量。
（3）PT衍生纤维蛋白原法：在血凝仪测定PT时，记录血浆开始凝固时的光密度值S1和血浆完全凝固时的光密度值S2，计算此过程光密度的变化值△S（△S=S1-S2），△S与血浆中纤维蛋白原含量成正比，从制作的纤维蛋白原含量对△S的标准曲线中查获待测血浆的纤维蛋白原含量。
2.参考区间 成人：2.00～4.00g/L；新生儿：1.25～3.00g/L。
3.方法学评价
（1）Clauss法（凝血酶法）
①是检测纤维蛋白原含量最常用的方法，操作简单，结果可靠，敏感性和特异性较高，是目前推荐使用的测定方法。仪器法精密度比手工法高，但当通过血凝仪检测PT方法来换算纤维蛋白原浓度时，如结果可疑，则应采用Clauss法复核确定。
②本方法检测需要纤维蛋白的结构正常，且有一定的含量，对低（无）纤维蛋白原血症和异常纤维蛋白原血症患者应用ELISA或RAI等免疫学方法测定。
（2）免疫学法：操作简便，但特异性不高，所测的不仅有凝固功能的纤维蛋白原，还包括部分FDP、其他蛋白以及异常纤维蛋白原，与生理性纤维蛋白原活性不一定呈平行关系。
（3）PT衍生纤维蛋白原测定法：该法测定纤维蛋白原的线性范围较窄，故当血浆纤维蛋白原含量过高时需要稀释血浆，尤其是纤维蛋白原的含量过低时结果往往偏高，需要采用Clauss等检测方法复核。
4.临床意义 纤维蛋白原是一种急性时相反应蛋白，在急慢性炎症和组织损伤坏死时可增高。纤维蛋白原水平增高是冠状动脉粥样硬化心脏病和脑血管病发病的独立危险因素之一。临床上纤维蛋白原含量测定主要用于出血性疾病或血栓性疾病的诊断以及溶栓治疗的监测。
（1）增高见于以下情况：
①炎症及组织损伤，如急性心肌梗死、肺炎、肝炎、胆囊炎、风湿性关节炎、大手术、放射治疗、烧伤等。
②血栓前状态、糖尿病、恶性肿瘤等。
③月经期、妊娠期也可增高。
（2）减低见于以下情况：
①DIC晚期、肝硬化、无纤维蛋白原血症或异常纤维蛋白原血症、原发性纤溶。
②某些药物，如雄激素、鱼油、纤溶酶原激活、高浓度肝素等。
（3）溶栓治疗监测：溶栓治疗（如用UK、t-PA）及蛇毒治疗（如用抗栓酶、去纤酶）的监测。
（二）血浆纤维蛋白（原）降解产物测定(https://www.daowen.com)
纤维蛋白原、可溶性纤维蛋白单体、纤维蛋白多聚体和交联纤维蛋白均可被纤溶酶降解，生成纤维蛋白（原）降解产物（FDP）。血液FDP浓度增高是体内纤溶亢进的标志，但不能鉴别原发性纤溶亢进与继发性纤溶亢进。
测定方法有胶乳凝集法、酶联免疫吸附法和仪器法（免疫比浊法），下面介绍胶乳凝集法。
1.检测原理 将FDP抗体包被于胶乳颗粒上，可与受检者血浆中的FDP发生抗原抗体反应，导致乳胶颗粒凝集。血浆中FDP浓度达到或超过5mg/L时，出现肉眼可见的凝集反应。根据待检血架的稀释度可计算出血浆中FDP含量。
2.参考区间 胶乳凝集法：阴性（＜5mg/L）；酶联免疫吸附法（ELISA）：＜10mg/L；仪器法（免疫比浊法）：＜5mg/L。
3.方法学评价
（1）胶乳凝集法操作简单，是目前测定FDP常用的方法。
（2）酶联免疫吸附法特异性高，可定量测定，但操作较复杂，影响因素较多。
（3）仪器法（免疫比浊法）操作简单、快速，结果准确，且易于质量控制，但成本较高。
4.临床意义 FDP阳性或FDP浓度增高见于原发性纤溶亢进，或继发性纤溶亢进，如DIC、肺栓塞、深静脉血栓形成、恶性肿瘤、肝脏疾病、器官移植排斥反应和溶栓治疗等。
（三）血浆D-二聚体测定
D-二聚体（D-dimer，D-D）是交联纤维蛋白在纤溶酶作用下的降解产物之一。继发性纤溶中纤溶酶的主要作用底物是纤维蛋白，生成特异性纤维蛋白降解产物D-D，所以D-D是继发性纤溶特有的代谢产物，对继发性纤溶的诊断具有特异性。下面介绍胶乳凝集法。
1.检测原理 将抗D-D单克隆抗体包被于胶乳颗粒上，可与受检者血浆中的D-D发生抗原抗体反应，导致乳胶颗粒凝集，且凝集的强度与血浆D-D的含量成正比。
2.参考区间 胶乳凝集法：阴性（＜250μg/L）；ELISA法：＜400μg/L；仪器法（免疫比浊法）：＜400μg/L。
3.方法学评价
（1）胶乳凝集法操作简便、快速，是一种较理想的筛检试验，但有一定的假阴性率，必要时可采用灵敏度更高的酶联免疫吸附法和仪器法。
（2）ELISA法特异性高，可定量测定，但操作较复杂，影响因素较多。
（3）仪器法（免疫比浊法）操作简单、可快速定量测定，结果准确，且易于质量控制，但成本较高。
4.临床意义 健康人血液D-D浓度很低，在血栓形成与继发性纤溶时D-D浓度显著增高。因此，D-D是DIC实验诊断中特异性较强的指标，并在排除血栓形成中有重要价值。
（1）阳性见于以下情况：
①继发性纤溶亢进症，如DIC。
②血栓性疾病，如脑栓塞、深静脉血栓、肺栓塞、动脉血栓栓塞等，是体内血栓形成的指标。
③其他疾病，如肝硬化、恶性肿瘤、妊娠（尤其产后）、手术等。
（2）原发性与继发性纤溶亢进症鉴别指标：继发性纤溶亢进D-D浓度增高，而在原发性纤溶尤进早期D-D浓度正常，可作为两者的鉴别指标之一。D-D阳性可作为继发性纤溶如DIC或其他血栓性疾病诊断的依据，其灵敏度达90%～95%。特异性仅为30%～40%，但阴性预测值可达95%以上，因此，D-D阴性基本可排除血栓形成。
（3）溶栓治疗的监测：使用尿激酶治疗时，D-D含量增高，用药后6小时最高，24小时后恢复至用药前水平。