四、凝血因子检验
凝血因子的检验用于出血性疾病的诊断和血栓前状态的监测，筛检试验主要有反映内源性凝血系统有无异常的凝血时间测定（clotting time，CT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）测定，反映外源性凝血系统有无异常的血浆凝血酶原时间（prothrombin time，PT）。确证试验包括简易凝血活酶生成试验（simple thromboplastin generation test，STGT）及纠正试验、血浆中凝血因子（Ⅲ及Ca2+除外）含量及活性的测定、血浆凝血酶原片段1+2（Prothrombin fragment 1+2，F1+2）的测定、血浆纤维蛋白肽A（fibrin peptide A，FPA）的测定、血栓前体蛋白及同型半胱氨酸等的测定。本节只介绍APTT和PT。
（一）APTT测定
在体外模拟体内内源性凝血的全部条件，测定血浆凝固所需的时间。反映内源性凝血因子、共同途径是否异常和血液中是否存在抗凝物质，APTT是常用且比较灵敏的内源性凝血系统的筛检指标。
1.检测原理 在受检的血浆中，加入足量的活化接触因子激活剂（如白陶土）激活凝血因子Ⅻ、Ⅺ，脑磷脂代替血小板第3因子，即满足内源性凝血的全部条件，测定加入Ca2+后血浆开始凝固所需的时间，即为APTT。
2.参考区间 25～35秒，超过正常对照值10秒为异常。但每个实验室必须建立相应的参考区间。
3.方法学评价 APTT是检测内源性凝血因子是否缺乏的比较灵敏的试验，而且检测FⅧ、FⅨ的灵敏度比FⅪ、FⅫ和共同途径中凝血因子更高，能检出FⅧ∶C小于25%的轻型血友病，故已替代试管法凝血时间（CT）。APTT测定手工法重复性差，但多次重复测定仍有相当程度的准确性，且操作简便，临床上仍在应用，并可用于仪器法校正。血凝仪法检测的准确性和灵敏度高于试管法，并且检测快速、简便，易于标准化。
4.临床意义
（1）APTT延长见于以下情况：
①较显著的因子Ⅷ、Ⅸ减低（如血友病甲、乙），因子Ⅺ缺乏症。
②严重的因子Ⅴ、因子Ⅹ、纤维蛋白原和凝血酶原缺乏（如肝病、新生儿出血症、口服抗凝剂、应用肝素以及低或无纤维蛋白原血症。
③血管性血友病。
④原发性或继发性纤溶活性增强。
⑤血液中抗凝物质增多，如存在抗凝血因子Ⅷ或因子Ⅸ抗体、狼疮抗凝物、华法林或肝素等。
（2）APTT缩短见于以下情况：
①血栓前状态：如DIC高凝期等。
②血栓性疾病：如心肌梗死、肺梗死、深静脉血栓形成、糖尿病血管病变、妊娠高血压综合征、肾病综合征、高血糖症及高脂血症等。
（3）监测肝素治疗：APTT对血浆肝素的浓度很敏感，是目前监测普通肝素抗凝治疗的首选指标。临床上，在应用中等剂量和大剂量肝素治疗期间必须作监测试验，一般使APTT维持在正常对照的1.5～2.5倍（75～100秒）。同时注意动态观察血小板数量，以血小板计数小于50×109/L为停药的指征。以保证抗凝治疗的安全、有效。
（二）PT测定（Quick一步法）
在体外模拟体内外源性凝血的全部条件，测定血浆凝固所需的时间。PT是常用的外源性凝血途径和共同凝血途径的筛检指标之一。(https://www.daowen.com)
1.检测原理 在受检血浆中，加入足够量的组织凝血活酶和适量的Ca2+，即可满足外源凝血的全部条件，测定加入后血浆开始凝固所需的时间，即为血浆凝血酶原时间。
2.结果
（1）直接报告：待检者PT：××.×秒；正常对照PT：××.×秒。
（2）凝血酶原比值（prothrombin ratio，PTR）：PTR=待检者PT/正常对照PT。
（3）国际标准化比值（international normalized ratio，INR）即PTRISI，ISI（international sensitivity index）为国际敏感度指数。
3.参考区间 每个实验室必须建立相应的参考区间。
（1）PT：成人11～13秒，超过正常对照值3秒为异常。
（2）INR：因ISI不同而异。
（3）PTR：成人0.85～1.15。
4.方法学评价 PT检测分手工法和仪器法，检测原理均采用1935年Quick创建的一步凝固法。手工法虽重复性差，但多次重复测定仍有相当程度的准确性，且操作简便，临床上仍在应用，并可用于仪器法校正。血凝仪法，干扰因素少、操作过程实现了标准化，检查快速、简便。
5.临床意义
（1）PT延长见于以下情况：
①先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ减低及低（无）纤维蛋白原、异常纤维蛋白原血症。
②获得性凝血因子缺乏，如DIC晚期（PT是DIC实验室筛检诊断标准之一）、严重肝病、阻塞性黄疸、维生素K缺乏等。
③血液循环中抗凝物质增多，如双香豆素、肝素等。
④原发性纤溶亢进。
（2）PT缩短：见于高凝状态（如DIC早期）、血栓前状态及血栓性疾病、口服避孕药等。
（3）口服抗凝药物的监测：INR为目前推荐的监测口服抗凝药的首选指标。国内一般将口服抗凝药达到有效剂量时的INR值定为2.0～3.0。