人绒毛膜促性腺激素检查
人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG），是由胎盘合体滋养层细胞产生的促进性腺发育的糖蛋白激素，对促性腺激素受体具有高度的亲和性。hCG主要存在于孕妇的血液、尿液、羊水和胎儿体内。在受精后第6天受精卵滋养层形成时，开始分泌微量的hCG；受精卵着床后，采用特异性β-hCG抗血清能在母体血液中检测出hCG。在妊娠早期hCG分泌量增高极快，大约1.7～2.0天即可增高1倍，至妊娠8～10周时血清浓度达到高峰，持续1～2周后迅速减低，妊娠晚期血清hCG浓度仅为峰值的10%，持续至分娩。分娩后若无胎盘残留，约于产后2周内消失。hCG是唯一不随胎盘重量增加而分泌增多的胎盘激素，分泌后直接进入母血，几乎不进入胎血循环。hCG可通过孕妇血液循环而排泄到尿液中，血清hCG浓度略高于尿液，且呈平行关系。
（一）检测原理
1.单克隆抗体胶体金试验 采用双抗体夹心法原理。将羊抗人hCG抗血清（多抗）、羊抗鼠IgG分别固定在特制的纤维素试带上并呈2条线上下排列，羊抗鼠IgG线在试带条上方为阴性对照，羊抗人hCG多抗在下方为测定线。试带条中含均匀分布的胶体金标记的鼠抗人β-hCG单克隆抗体和无关的金标鼠IgG。检测时将试带浸入被检尿液中后迅速取出，尿液沿试带浸润，尿液中的β-hCG与胶体金标记单抗结合，待行到羊抗人hCG抗体线时，形成金标记的β-hCG单抗-尿hCG-羊抗人hCG复合物而在试带上显紫红色区带，为hCG阳性反应，试带上无关的金标记鼠IgG随尿继续上行到羊抗鼠IgG处时与之形成紫红色的金标记抗原抗体复合物为阴性对照。判断结果时，如果试带上有2条紫红色线条，则为阳性，如果仅可见1条线，则为阴性。本法灵敏度好，可达10～25U/L，操作简便易行。
2.酶联免疫吸附试验（ELISA） 本试验的原理是利用二点酶免疫法，即将抗β-hCG单克隆抗体包被于固相表面，样品中的hCG与支持物表面的抗体相结合，加入酶标记的hCG二抗及显色剂后可出现呈色反应。该法可目测，灵敏度为20～50U/L，特异性高，广泛应用，可作早期筛选检验。
3.放射免疫试验（RIA） 本法是利用放射标记的hCG与被检测尿液中hCG竞争性地结合抗-hCG抗体，当被检测尿液中hCG增加时，结合物的放射性减低，与不同含量标准品对比可测出尿液中hCG的含量。本法优点是灵敏度好，可达2U/L。但设备要求高，并且还有放射性污染的问题。
4.化学发光免疫法（electro-chemiuminescence immunoassay，ECLIA） 本法采用双抗夹心模式，即标本中的hCG抗原与微粒上的单克隆hCG抗体结合，再与液相中荧光剂标记的多克隆hCG抗体结合，因待测hCG抗原问题与仪器测得的发光单位量存在正比关系，由此求得hCG的含量。本法是利用微粒子作为载体，使得抗原抗体反应能在均相中进行，因反应表面积增大、捕捉抗原迅速，孵育反应时间大大缩短，所需样本量也极少。化学发光法是近几年发展起来的一种检测技术，具有特异性强、灵敏度高、无污染等优点。
5.间接免疫凝集抑制试验 有胶乳凝集抑制试验（latex agglutination inhibition test，LAIT）和间接血凝抑制试验（hemoagglutination inhibition test，HAIT）。两者区别在于便于肉眼观察的颗粒采用的是胶乳还是红细胞，LAIT中hCG致敏在胶乳颗粒上，HAIT中hCG致敏在红细胞上。试剂1为抗hCG，试剂2为致敏hCG的颗粒（胶乳或红细胞），如果将试剂1与试剂2作用，抗体与颗粒抗原结合发生肉眼可见的抗原抗体反应，即免疫凝聚反应。抑制试验是先将试剂1（hCG抗体）与hCG作用形成肉眼不可见的抗原抗体复合物，再加入试剂2，因作为抗体的试剂1已消耗完，不再发生凝集反应，即反应被尿液中存在的hCG抑制，试剂仍显为均匀状，则为阳性。反之，尿液中不含hCG，试剂1仍与后加入的hCG致敏颗粒结合出现凝集为阴性。
6.检孕卡法 将交联有hCG的胶乳和抗hCG血清分别冷冻干固在卡片的2个试剂圈内，用被检尿液溶解抗血清（检孕卡右侧试剂圈的干点），生理盐水溶解hCG胶乳抗原（检孕卡左侧试剂圈的干点）30秒后，将左右两侧液体混合，进行胶乳凝集抑制试验。2分钟～3分钟内，出现明显的、均匀一致的凝集颗粒者为阴性反应，呈现均匀乳状无凝集现象为阳性。此法操作简便、快速、灵敏度与LAIT、HAIT相似。
除以上检测方法外，hCG检测方法还有斑点免疫层析法、免疫化学发光法。前者简便易行，后者灵敏度高，但尚未普及。另外，生物学试验是早期检查hCG的主要方法，如果操作规范，试验的准确率可达98%以上，假阳性和假阴性很少，但试验方法烦琐，不适合大批量标本检测，目前已淘汰。尿液hCG几种不同检验方法比较见表2-31。
（二）方法学评价（表2-31）。
表2-31 尿液hCG测定的方法学评价
（三）质量保证
1.标本要新鲜，留尿前不要大量饮水以免稀释，晨尿最好。若为蛋白尿、血红蛋白尿，应加热煮沸3分钟后，离心取上清液检查。不宜使用严重的血尿、菌尿标本检查hCG。
2.每批试验均应设定阳性对照和阴性对照。对照试验得到预期结果，才能签发报告。每份尿液均做双份检查，即以原浓度和倍量稀释后的尿液同时检查，一并报告结果。原浓度尿液和2倍稀释尿液均为hCG阳性反应，则为真正阳性反应；原浓度尿液阳性，而稀释尿液为阴性，可能为弱阳性反应或为LH增高等引起的假阳性反应。(https://www.daowen.com)
3.单克隆胶体金试带，操作时注意试带浸入尿液时，液面要低于两抗体检测线。每次测定应设置阴、阳性对照，同时做原浓度和2倍稀释浓度尿液，2种浓度尿液均为hCG阳性反应，可视其为真正阳性反应。
4.放射免疫法，工作人员应注意防护，同时尽量避免环境污染。
5.酶联免疫吸附法，要注意洗净未结合的酶联抗体。
6.电化学发光法，批号不同的试剂不能混用，每批试剂应分别制作标准曲线。
7.为避免假阳性可采取以下措施 ①尽量采用单克隆抗体二点酶免疫法，减少交叉反应。②由于排卵期LH增高只有3天，育龄期妇女应避开排卵期或排卵后3天留尿检查。③对双侧卵巢切除的患者，可每天肌注丙酸睾丸酮50mg，连续3天，可使LH降至4ng/L以下，再留尿检查，可排除LH的影响。
（四）参考值
妊娠不同时期以及不同妊娠个体之间血清hCG绝对值变化大，一般非孕妇女hCG＜100U/L（β-hCG＜20U/L）。
（五）临床意义
hCG的检查对早期妊娠诊断有重要意义，对与妊娠相关疾病、滋养细胞肿瘤等疾病的诊断、鉴别和病程观察等有一定价值。
1.早期妊娠诊断（early pregnant diagnosis） 在受孕1周后血清中的hCG大约在50IU/L左右，7～14天尿液当中可测出，60～70天达到高峰。
2.流产诊断和监察 ①先兆流产：尿液hCG仍维持在高水平一般不会发生流产，如hCG在200ng/L以下，并逐渐减低，则有流产或死胎的可能；当hCG降至8ng/L以下则难免流产。在保胎治疗过程中，如hCG不断增高，说明保胎有效。如果hCG持续减低，说明保胎无效，不必再继续保胎治疗，应尽早处理，以免死胎滞留过久而发生宫内感染。②不全流产：不全流产时宫腔内尚有残留的胎盘组织，hCG检查仍可呈阳性；完全流产或死胎时hCG由阳性转为阴性。因此，检查hCG可作为保胎治疗和判断流产的参考依据。
3.异位妊娠的诊断 检查hCG是目前诊断异位妊娠的重要方法之一。异位妊娠时，只有60%～80%的患者hCG呈阳性，但hCG阴性者仍不能完全排除异位妊娠。
4.滋养细胞肿瘤诊断与疗效监测 ①由于葡萄胎、侵袭性葡萄胎、绒毛膜上皮癌等妊娠滋养细胞疾病的患者滋养细胞高度增生，产生大量的hCG，血清及尿液中hCG明显增高，hCG浓度往往明显大于正常妊娠月份值。利用这种差别，可作为妊娠滋养细胞疾病的辅助诊断。妊娠滋养细胞疾病患者，hCG浓度是正常妊娠妇女的100多倍，当子宫达到或超过12周妊娠大小，hCG值仍然维持在高峰水平而不减低时，提示滋养细胞疾病。②正常妊娠时，hCG峰值在停经后60～70天，可能与葡萄胎发病时间同期，而造成诊断困难。若连续测定hCG或与B超检查同时进行，即可作出鉴别。③葡萄胎清除后12～16周，hCG转为阴性；若hCG减低缓慢或减低后又上升，或12～16周后仍未转为阴性者，则提示有妊娠滋养细胞肿瘤的可能，应给予预防性化学疗法。④妊娠滋养细胞肿瘤患者术后3周，hCG应小于4ng/L，8～12周呈阴性；如hCG不减低或不转阴性，提示可能有残留病灶，应定期检查，以预防复发。
5.唐氏综合征产前筛选试验 唐氏综合征孕妇血清AFP和非结合型雌三醇（UE3）含量降低，而hCG血清含量升高，此为唐氏综合征三联试验的指标之一。
6.其他 近年发现一些恶性肿瘤，如畸胎瘤、胃癌、肝癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌等，血中hCG水平可升高，因此可将hCG看做是一种非特异性癌标志物。另外，内分泌疾病如甲状腺功能亢进、脑垂体疾病，妇科疾病如卵巢囊肿、子宫癌等hCG也可增高。