CD276与HER2在食管鳞癌及癌旁组织中的表达
利用IHC检测目的抗原在不同组织中的表达并分析其表达强度。新鲜肿瘤和癌旁组织经固定包埋后，利用商品化抗体及试剂盒对组织切片染色，并进行组化评分，确认CD276或HER2在不同组织中的蛋白表达水平；购买的正常组织切片，直接进行染色等操作。切片染色结果依据细胞染色比例及强度进行半定量评分后，进行加权并对抗原表达评价。其中，细胞染色比例评分标准如下：①0%肿瘤细胞染色；②≤20%肿瘤细胞染色；③20%～30%肿瘤细胞染色；④31%～50%肿瘤细胞染色；⑤＞50%肿瘤细胞染色。细胞染色强度评分标准如下：①无染色；②弱染色；③中度染色；④强染色。对染色比例和染色强度得分进行加权后，评价抗原表达水平，其中： 阴性（-）：0分；弱阳性（＋）：1～4分；中度阳性（＋＋）：5～8分；强阳性（＋＋＋）：9～12分。在本研究中，中度阳性与强阳性染色标本（＋＋与＋＋＋）被认为是抗原过表达样品。
对47例食管鳞癌患者的肿瘤组织与癌旁组织进行IHC分析（IHC评分标准详见研究方案部分），结果显示CD276在肿瘤细胞中的表达强度与阳性率均较高（图16-10），其中弱阳性（＋）比例为12.77%，强阳性（＋＋与＋＋＋）比例为80.85%（表16-1），提示CD276在大多数食管鳞癌患者的肿瘤组织中过表达。对癌旁组织的分析发现，CD276仅在25.53%标本中呈弱阳性，未有强阳性表达（图16-10；表16-1），说明CD276主要在食管鳞癌肿瘤组织中表达，以CD276为靶点进行CAR-T治疗可能适用于多数食管鳞癌患者。对HER2的分析发现，38.3%肿瘤组织过表达该抗原（＋＋与＋＋＋），而仅有2%癌旁组织显示了较高水平的HER2表达（图16-10；表16-1）。上述结果提示CD276与HER2在食管鳞癌肿瘤中高表达，能够成为食管鳞癌的治疗靶点。
图16-10 利用IHC 检测CD276 与HER2 表达
食管鳞癌肿瘤组织与配对癌旁组织经石蜡包埋并切片后，利用商品化试剂盒检测CD276与HER2在不同组织中的表达。图中展示了同型对照染色（Isotype），癌旁组织染色（Adjacent）与肿瘤组织染色（Malignant）的典型结果。(https://www.daowen.com)
表16-1 CD276 与HER2 在食管鳞癌肿瘤及癌旁组织中的表达分析
对上述标本进行进一步分析。在47例食管鳞癌标本中，仅2例（4.26%）既不表达CD276也不表达HER2，其余患者至少表达1种抗原（表16-2）。更为重要的是，在27例标本（57.45%）中能够同时检测到2种抗原表达，其中15例（31.91%）肿瘤组织的CD276与HER2表达均呈强阳性（表16-2），提示CD276与HER2可能是CAR-T细胞联合治疗的较佳靶点组合。
表16-2 CD276 与HER2 在食管鳞癌组织中的共表达情况
