肿瘤细胞抗原表达改变及活性分析

本研究主要检测CAR-T细胞杀伤后，肿瘤细胞的抗原表达及活性改变。主要采用长期共孵育实验进行验证。按照效靶比（E∶T＝0∶1和1∶5）将靶细胞（抗原阳性）与CAR-T细胞混合孵育，并在孵育当天和孵育后3天、7天和10天检测靶细胞抗原（CD276和HER2）表达水平和肿瘤细胞数量。

在长期共孵育的不同阶段，利用流式细胞术检测发现，双靶点CAR-T细胞能够克服抗原丢失、有效地杀伤肿瘤细胞，有望避免肿瘤免疫逃逸（图16-20）。这些结果初步说明双靶点CAR-T细胞能够避免抗原下调导致的治疗失败，可更有效地杀伤食管癌细胞。

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图16-20　双靶点CAR-T 细胞杀伤后，肿瘤细胞抗原表达改变

按照E∶T＝1∶5，将双靶点CAR-T细胞（CD276/HER2-BBz）与TE-1细胞共培养后不同时间，检测肿瘤细胞上CD276与HER2的表达。