PDX肿瘤模型的建立

相比细胞系移植瘤模型，PDX肿瘤模型能够更好地反应肿瘤异质性，适合用于双靶点CAR-T细胞活性检测。为了构建PDX肿瘤模型，将新鲜肿瘤组织迅速用预冷PBS冲洗3次并修剪掉坏死组织后，切成绿豆粒大小的组织块，在组织离体30分钟内接种于NODSCID小鼠皮下（P1代）。同时，对剩余组织进行抗原表达检测。将确诊ESCC且表达目的基因（CD276和HER2）的肿瘤组织进行PDX传代。待P1代肿瘤长至合适体积后，手术取出肿块，切成小块后再次传代（P2代）。在P3代时，对抗原表达进行确认。将确认表达相关抗原的P3代组织切成小块冻存待用。P3代PDX组织复苏后接种于NOD-SCID小鼠皮下。待PDX肿瘤组织长至合适大小时，进行实验。(https://www.daowen.com)

人食管鳞癌PDX肿瘤组织传至P3代时，进行IHC分析。结果显示P3代肿瘤细胞上有较强的CD276与HER2表达（图16-21），说明PDX模型构建成功，可用于CAR-T细胞相关研究。