2.1.2 主要仪器设备

更新于 2026年10月13日 版权声明
2.1.2 主要仪器设备

1)仪器

(1)超净工作台

超净工作台是目前普遍应用的无菌操作装置,如图2.1所示。其工作原理主要是利用鼓风机驱动室内空气经粗滤布首次过滤,再经高效空气过滤器除去空气中的尘埃颗粒,使空气得到净化。净化空气以一定的速度通过工作台面,使工作台内构成无菌环境。工作台顶部配有紫外灯,可杀死操作区台面的微生物。超净工作台按气流方向的不同可分为外流式(水平流)和侧流式(垂直流)两种。侧流式(垂直流)工作台应用广泛,洁净度应达到100级,国内产品一般都可达标。在布置上可视场地大小选用一个较宽的或者多个较小的操作台。

(2)倒置显微镜

倒置显微镜是细胞培养室必须具备的设备之一,用于观察细胞的生长情况和污染情况等,如图2.2所示。若有条件,尚可配置带有照相系统的高质量相差显微镜、解剖显微镜、录像系统等装置,以便随时观察、记录、摄影细胞生长情况。

图示

图2.1 超净工作台

图示

图2.2 倒置显微镜

(3)控温设备

控温设备主要指CO2培养箱(图2.3)、隔水式电热恒温培养箱、生化培养箱、小型孵化器、冰箱、低温冷藏箱、制冰机、水浴摇床、水浴箱等设备。主要提供细胞源(如胚胎)、处理细胞源、培养细胞、保存药品和细胞株。

(4)消毒设备

直接或间接与细胞接触的物品都要经过消毒处理,常用高压蒸气灭菌锅(图2.4)和电热干燥箱。高压蒸气灭菌锅一般用于培养用的三蒸水、不含糖的缓冲液、手术器械、台布和衣帽、橡胶制品等的消毒灭菌;电热干燥箱主要用于某些器械、器皿的烘干和玻璃器皿等的干热消毒。电热干燥箱升温较高,一般需达到160℃以上。需注意的是,细胞培养用液不宜用干、湿热法灭菌,故实验室还应配置不锈钢滤器对培养用液过滤消毒。

图示

图2.3 CO2培养箱

图示

图2.4 高压蒸气灭菌锅

(5)离心机

进行细胞培养时,用离心机(图2.5)进行细胞悬液制备、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作,常用低速离心机(转速为2 000~4 000 r/min)。但某些特殊细胞需要控温,故应配置一台冷冻离心机。

(6)细胞计数设备

一般可借助血细胞计数板进行计数,若条件允许可配置电子细胞计数仪,它可自动计数细胞悬液中的细胞数,省时省力。

(7)天平

天平用于称量化学试剂,常用的有扭力天平、精密天平和各种电子天平(图2.6),另外,细胞培养实验室还需配置一台普通天平,用于培养用液离心时平衡。(https://www.daowen.com)

图示

图2.5 离心机

图示

图2.6 电子天平

(8)水纯化装置

细胞培养对水质要求很高。培养器皿经泡酸和自来水冲洗后,最后需用双蒸水漂洗,配制各种培养用液更是要求使用经过3次蒸馏或超纯水装置(图2.7)制备的超纯水。一般配制培养液的用水应在配液前蒸馏,不宜使用存放数日的三蒸水,以免影响培养用水的质量。

图示

图2.7 超纯水装置

2)常用的培养器皿

(1)培养瓶

培养瓶由玻璃或塑料制成,主要用于培养、繁殖细胞。进行培养时培养瓶瓶口加螺旋瓶盖或胶塞,胶塞多用于密封培养。国产培养瓶的规格以容量(mL)表示,如250、100、25 mL等;进口培养瓶则多以底面积(cm2)表示。

(2)培养皿

培养皿由玻璃或塑料制成,供盛取、分离、处理组织或做细胞毒性、集落形成、单细胞分离、同位素掺入、细胞繁殖等实验使用。常用的培养皿规格有10、9、6、3.5 cm等。

(3)多孔培养板

多孔培养板为塑料制品。可供细胞克隆及细胞毒性等各种检测实验使用。其优点是节约样本及试剂,可同时测试大量样本,易于进行无菌操作。培养板分为各种规格,常用的规格有96、24、12、6、4孔等。

(4)培养操作有关的器皿

①贮液瓶。主要用于存放或配制各种培养用液体如培养液、血清及试剂等。贮液瓶分为各种不同规格,如1 000、500、250、100、50、5 mL等。

②吸管。主要分为刻度吸管、无刻度吸管。刻度吸管主要用于吸取、转移液体,常用的有1、2、5、10 mL等规格。无刻度吸管分为直头吸管和弯头吸管,除可以作吸取、转移液体外,弯头尖吸管还常用于吹打、混匀及传代细胞。

图示

图2.8 加样器

③加样器。加样器也称为移液器,用于吸取、移动液体或滴加样本(图2.8)。可根据需要调节量的大小,吸量准确、方便。尤以微量加样器,可保证实验样品(或试剂)含量更精确,重复性更好。目前,可用于高温消毒的、多通道的各类移液器可供使用者选择,以确保加样准确、快速、方便并且达到无菌要求。

④其他用品。尚有用于冷冻保存的容器液氮罐,收集细胞用的离心管,放置试剂或临时插置吸管用的试管,装放吸管以便消毒的玻璃或不锈钢容器,用于存放小件培养物品便于高压消毒的铝制饭盒或贮槽,套于吸管顶部的橡胶吸头,封闭各种瓶、管的胶塞、盖子、冻存细胞用的安瓿或冻存管、不同规格的注射器、烧杯和量筒以及漏斗,超净工作台使用的酒精灯,供实验人员操作前清洁消毒使用的盛有酒精或其他消毒液的微型喷壶,用于过滤经消化处理的细胞悬液的筛网,将贴壁生长细胞从培养平皿壁上刮下来的细胞刮刀等。

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