2.2.1 洗涤技术
细胞培养过程中要用到大量工具，如玻璃器皿、金属器械或塑料制品之类。由于离体细胞对任何有毒有害物质均十分敏感，因此，在实验操作前要严格对所用工具进行清洗和灭菌，保证后续无菌操作的顺利进行。
根据培养用具材料的物理特性、化学特性不同，清洗的方法和程序也不同。
1）洁净剂的种类及使用
最常用的洁净剂是肥皂、肥皂液（特制商品）、洗衣粉、去污粉、洗液、有机溶剂等。
肥皂、肥皂液、洗衣粉、去污粉用于可以用刷子直接刷洗的仪器，如烧杯、三角瓶和试剂瓶等；洗液多用于不便用于刷子洗刷的仪器，如滴定管、移液管、容量瓶、蒸馏器等特殊形状的仪器，也用于洗涤长久不用的杯皿器具和刷子刷不下的结垢。用洗液洗涤仪器，是利用洗液本身与污物起化学反应的作用，将污物去除。因此需要浸泡一定的时间使其充分作用；有机溶剂是针对污物属于某种类型的油腻性，而借助有机溶剂能溶解油脂的作用将其洗除，或借助某些有机溶剂能与水混合而又挥发快的特殊性，冲洗一下带水的仪器。如甲苯、二甲苯、汽油等可以洗油垢，酒精、乙醚和丙酮可以冲洗刚洗净而带水的仪器。
在器皿的洗涤过程中还经常要用到洗涤液，根据清洗要求的不同，可配制不同类型和浓度的洗涤液，见表2.1。
表2.1 常用洗涤剂的配制与适用范围
大多数洗液具有强腐蚀性，对皮肤、衣物等造成腐蚀，配制和使用洗液时，应充分注意安全。操作时严格按照实验操作规范，穿戴手套、胶靴、围裙和眼镜。在配液时需将酸缓慢加入水中，以防酸遇水放热导致玻璃或陶瓷容器破裂。切勿将水加入酸中。
2）玻璃器皿的洗涤(https://www.daowen.com)
由于在细胞培养中要用到大量玻璃器皿，玻璃器皿的清洗与细胞培养能否成功息息相关。洁净的玻璃器皿要求干净透明、无污渍。
新瓶使用前应先用自来水简单刷洗，然后用稀盐酸溶液（5%）浸泡过夜；培养后的玻璃器皿用后应立即浸入清水中。
注意：让水能完全进入瓶皿中，不应留有气泡。器皿要充满清洁液浸泡，勿留气泡。浸泡时间不应少于6 h，一般应浸泡过夜。浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗涤剂洗涤（宜选用软毛刷和优质的洗涤剂，如高级洗衣粉或洗洁精），洗刷时特别注意洗刷瓶角部位。刷洗和浸酸后都必须用水充分冲洗，使之不留任何残迹。冲洗宜用洗涤装置，以保证冲洗效果，如用手工操作，每瓶都得用水灌满，倒掉，重复10次以上，最后再用蒸馏水漂洗2～3次，晾干备用。
3）胶塞的清洗
新购置的胶塞先用自来水冲洗干净后，再作常规处理。常规洗涤方法如图2.9所示。
图2.9 常规洗涤方法示意图
4）塑料器皿的清洗
目前细胞培养使用的塑料器皿是一种无毒并已经消毒过灭菌密封包装的商品。使用时只要打开包装即可，为一次使用性物品。必要时，用后经无菌处理后，尚可反复使用2～3次，但不宜过多。再用时仍然需要清洗和灭菌处理。塑料器皿质地软，不宜用毛刷刷洗，造成清洗困难。为此使用中一是防止划痕，二是用后要立即浸入水中，严防附着物干结；如残留有附着物，可用脱脂棉清拭掉，用流水冲洗干净，晾干，再用2%NaOH液浸泡过夜，用自来水充分冲洗，然后用5%盐酸溶液浸泡30 min，最后用自来水冲洗和蒸馏水漂洗干净，晾干后备用。
