3.4.1　单细胞分离方法

1）机械法

单细胞分离的机械法是从完整的植物器官中分离单细胞的方法之一。如分离叶肉组织单细胞的具体做法：将叶片轻轻研碎，经过滤和离心，收集和净化细胞。另一种分离细胞的物理方法是从培养的未分化且疏松易碎的愈伤组织中获得单细胞。即用摇床振荡方法使悬浮培养中疏松易碎的愈伤组织细胞分散成单细胞和小细胞团。机械法分离细胞的优点：细胞未受酶伤害；有利于进行细胞的生理和生化研究。

2）酶法(https://www.daowen.com)

单细胞分离的酶法是指利用果胶酶、纤维素酶处理植物叶片或其他外植体，使细胞分离的方法。Takebe最早报道了用果胶酶分离烟草叶肉细胞获得成功。酶法分离细胞的优点是可以得到较多的叶肉游离细胞，但对禾本科植物叶片酶法分离细胞较困难。

3）化学法

单细胞分离的化学法是指利用一些化学药剂游离细胞的方法。如处理胡萝卜悬浮细胞培养物时，加草酸钙可获得分散细胞。此外，秋水仙碱、2，4-D或LH对分散细胞均有一定作用。