9.5.1 冷冻保护剂
和植物细胞冻存的原理相似,在动物细胞超低温保存时也必须使用冷冻保护剂。各种动物细胞适用的冷冻保护剂种类和用量不完全一样,常用的也是二甲亚砜(DMSO)和甘油等。DMSO的常用浓度为5%~10%。DMSO有一定的毒副作用,而在4℃时,其毒副作用会大大减弱,且能以较快的速度渗透入细胞内。因此,选用DMSO处理时应在4℃进行,耗时为40~60 min。(https://www.daowen.com)
不同类型的冷冻保护剂有不同的特点,目前有联合使用两种以上冷冻保护剂的趋势。如造血干细胞冻存时,采用5%DMSO和6%羟乙基淀粉(HES)两种冷冻保护剂联合使用。