9.5.2　常规冷冻方法

动物细胞冻存和复苏的基本原则是慢冻快融。慢冻时结冰在细胞外形成，不致损害细胞。不同细胞的最适冻存速率、冻存过程、冷冻保护剂种类和用量等不同。目前广泛采用的是二步冻结法，即先将细胞慢速冷冻至一定温度，使细胞胞外冻结，胞内脱水，然后再快速降温，置液氮中长期保存储藏。(https://www.daowen.com)

复苏是以一定的复温速度将冻存的培养物恢复到常温的过程。具体操作是将装有细胞的冻存管从液氮中取出，立即投入37℃水浴中解冻，以避免再次结冰。由于DMSO等保护剂在常温下对细胞有害，故在细胞复苏解冻后要及时洗掉冷冻保护剂。