12.5.1 iPS细胞的建立
目前,iPS细胞的建立方法如图12.1所示,简言之:分离和培养宿主细胞;通过病毒(逆转录病毒、慢病毒或腺病毒)介导的方式将外源基因导入宿主细胞;将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上,并于ES细胞专用培养体系中培养,同时在培养液中根据需要加入相应的小分子物质以促进重编程;数天后,出现ES克隆样的克隆;在细胞形态、基因表达谱、表观遗传学、畸胎瘤形成和体外分化等方面对这些克隆进行鉴定。
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图12.1 体细胞重编为iPS细胞的流程示意图