4.2.5 双向电泳技术
广义的双向电泳(two-dimensional eletrophoresis)是指将样品进行完第一次电泳后,为了达到某一目的而在它的垂直方向上再进行一次电泳的技术。目前所说的双向电泳大都是指首先根据蛋白质等电点不同在pH梯度胶中进行等电聚焦(isoelectric focusing,IEF)将其分离,然后按照它们的相对分子质量大小在垂直方向或水平方向进行SDS-PAGE第二次分离(图4-4)。常见的分离系统有ISO-DALT与IPG-DALT两种系统。ISO-DALT系统虽有很高的分辨率,但是还有诸如操作较烦琐、载体两性电解质pH梯度不稳定、重复性不好等缺点,而IPG-DALT系统则因恰好弥补了上述ISO-DALT系统的不足之处而被广泛应用。