5.4　从cDNA文库获得目的基因

真核生物基因组DNA十分庞大，含有大量的重复序列。采用电泳分离和杂交的方法，都难以直接分离到目的基因。高等生物一般具有1×104种左右不同的基因，但在一定阶段，细胞大约只有15％的基因得以表达。因此，由mRNA出发的cDNA克隆，其复杂程度要比直接从基因组克隆简单得多。

提取组织细胞的mRNA，逆转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒）连接后转化宿主菌，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库（cDNA library）。cDNA文库比基因组DNA文库小很多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。因此，构建合适的cDNA文库，并用适当的方法从文库中筛选目的基因，已成为真核生物细胞分离基因的常用方法。