6.3.11　DNA序列测定法

DNA序列测定，即核酸一级结构的测定，简称DNA测序。它是现代分子生物学和基因工程操作中占有极其重要地位的一门技术。对克隆DNA片段进行序列测定及分析，不仅可以直观地鉴定出重组DNA分子中是否含有目的基因，也可以获得目的基因的编码序列和基因调控序列，这对目的基因的表达及功能研究具有重要意义。

随着相关科学技术的发展，已涌现出多种基因测序技术，统称为第二代测序技术。第二代测序技术的核心思想是边合成边测序（sequencing by synthesis），即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序列，现有的技术平台主要包括Roche/454 FLX、Illumina/Solexa Genome Analyzer和Applied Biosystems SOLID system。第二代测序技术使得核酸测序实现了速度和价格双重突破，为破译大量的核酸序列提供了支持。目前，第二代测序技术主要用于高通量的测序，如基因组测序、转录组测序等。