技能3 隐球菌病的诊断与防治
一、临床症状
猫的感染比犬多见，但无品种、性别和年龄差异。其临床表现一般与上呼吸道、鼻咽部、皮肤、眼及中枢神经系统感染有关。约60％病例有与鼻腔感染有关的上呼吸道症状，表现为打喷嚏、咳嗽甚至呼吸困难，高热，有鼻塞声，单侧或双侧鼻腔有黏液脓性分泌物，并可能带血。鼻腔内或鼻梁上可见增生性软组织团块或溃疡，偶尔可见口腔溃疡或咽喉病变。约40％的病例皮肤或皮下组织受侵害，表现为皮肤丘疹、脓疱、结节，并可能出现溃疡或炎性渗出和坏死，局部淋巴结发炎（扫描右侧二维码查看）。从呼吸系统经血液传播也可能引起骨髓炎导致跛行，或肾脏感染引起肾衰竭，甚至全身性淋巴结炎。
感染中枢神经系统的病例主要表现为精神沉郁、肌肉痉挛、摇头、共济失调、转圈运动、行为异常、抽搐、角弓反张、跛行、呕吐、流脓涕、眼眵、失明、麻痹、嗅觉丧失甚至发意识障碍等神经症状。并发白血病或免疫缺陷综合征的猫容易发生中枢神经系统和眼部症状。犬比猫较易发生严重的扩散性感染。多数病例中枢神经系统和眼受侵害，中枢神经系统损害主要为脑组织，但脊髓也可能同时被感染，表现为脑膜脑炎、视神经炎、视网膜炎的症状。
二、诊断
1.细胞学检查 皮肤渗出液、脓汁、粪尿、血或胸水等进行细胞学检查。操作如下：痰或脓汁等可用生理盐水适当稀释后制片，脑脊髓液先经离心，取沉淀物制片。然后加一滴印度墨汁或苯胺黑染色，覆以盖玻片后直接镜检。镜下可见隐球菌的圆形、椭圆形菌体，周围有比菌体宽1～2倍的空白圈（荚膜），子孢子内有一大的反光颗粒，部分菌体表面有出芽现象。对穿刺样本的组织切片进行PAS苏木精染色，菌体细胞着染，荚膜不被染色而在细胞周边呈环形空白。黏蛋白卡红染色时酵母细胞壁和荚膜呈红色，具有诊断意义。如能采集到较大体积的样本，可进行病原菌的分离培养，新型隐球菌在血液琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂上生长良好。
2.血清学检测 对可疑病例采用血清学方法检测血清、尿液或脑脊髓液中的荚膜抗原，另外，抗原效价测定还可以用于评价治疗效果。可用检测抗原的商品化试剂盒。
3.免疫学检查 可以用其培养物制成抗原，应用荧光抗体、补体结合试验，乳胶凝集试验等方法进行免疫学检测。
4.组织病理学检查 皮肤结节之弥漫性化脓性肉芽肿性皮炎和腹膜炎有多量酵母样菌或由于菌多而没有炎症，致使真皮和皮下组织成空泡状。
5.分子生物学检测 该法应用DNA探针法和聚合酶链式反应（PCR），具有高度的特异性。不仅可以特异性地检测隐球菌，不受治疗的影响，而且可以区别变种，可用于感染早期的诊断，特别是PCR方法敏感性更高，可用于痰液、支气管肺泡灌洗液及经支气管吸出物的检测。
三、防治
全身抗真菌治疗。临床治愈后继续巩固治疗1个月。比较理想的是治疗延续到隐球菌抗原滴度呈阴性。酮康唑（猫），口服，混于食物中，1～2次/d。
本病目前尚无可靠的疫苗。预防工作的重点是加强饲养管理、搞好卫生防疫和隔离消毒工作，提高动物的抗病力，减少条件性病原菌的感染率。(https://www.daowen.com)
病死动物尸体必须做无害化处理，防止污染土壤。除非累及中枢神经系统，猫和犬的预后一般良好。
四、相关知识
隐球菌病可感染多种哺乳动物，最常见于犬、猫，多呈慢性亚急性经过。年轻的成年犬、猫发病率最高。隐球菌病是多种动物共患传染病，世界各国均有发生，也有人发病的报道。
隐球菌广泛存在于自然界，在土壤、污水、腐烂果蔬、植物、鸽粪、牛奶中均存在，并可以从正常动物的皮肤、黏膜、肠道中分离得到。鸽子是本菌的重要传播媒介，隐球菌可利用鸽粪中高浓度肌酐酸和尿酸并在鸽粪中生存而造成感染。被本病污染的空气、饲料、饮水和用具经呼吸道、消化道和皮肤等途径侵入动物机体，引起感染并损害肺、消化道、神经系统和皮肤等而发病。
多数病原菌可能因个体较大不能进入肺脏内部而停留于鼻腔或咽喉部，引起病理损伤或使动物成为无症状的带菌者。干燥小隐球菌可进入小支气管和肺泡中引起肺脏疾病。吸入鼻腔、鼻旁窦和肺脏后刺激机体的细胞免疫反应，导致肉芽肿形成。病菌可直接或经血液扩散，通过筛板经鼻腔扩散到中枢神经系统或鼻窦的软组织及皮肤组织等。皮肤和黏膜是次要的侵入途径。无论从何处入侵，最终大部分病例都扩展到中枢神经系统，少数病例只侵害肺部。
被侵害动物发病往往与机体抵抗力低下、体况不佳及各种应激因素的作用直接有关，也可引起内源性发病。
夏季炎热潮湿环境中，孢子易繁殖传播。
五、病例举例
德国牧羊犬，5岁，体重36 kg，因右后肢于15 d前出现轻微跛行而入院检查，之前无外伤史。进行身体检查时，发现右后肢上部肌肉发生萎缩，右后膝关节可见明显肿胀。触诊该部位时可引发疼痛，其他检查结果未发现明显异常。
◆执业兽医资格考试相关试题
隐球菌病的传染源主要是（ ）。
A.猫 B.人 C.猪 D.狗 E.鸽子
