技能4 球孢子菌的诊断与防治
一、临床症状
犬感染本病的潜伏期为1～3周。临床表现的严重程度与机体的免疫反应有关，大部分感染犬、猫在产生有效的免疫反应之前可能有轻微的呼吸道症状或不表现任何症状，然后自然康复，也有少数动物不产生有效的免疫反应，表现明显的呼吸道症状。原发性病例主要侵害肺脏和皮肤。
从呼吸道吸入的孢子侵入肺组织内，在肺脏及支气管或者是纵隔淋巴结中发生肉芽肿，X线检查可见急性进行性病变区和结核样浸润变化，然后弥散至胸腔、肝脏、肾脏等全身多种组织。患病动物体温升高，食欲不振，咳嗽，呼吸困难，消瘦，因骨骼肿胀、疼痛而跛行；也可发生眼病、呕吐、慢性腹泻、消化不良、虚脱及外周淋巴结肿胀化脓，读者可扫描右侧二维码查看。侵害关节时，偶见关节炎、跛行及肌肉萎缩。皮肤丘疹、结节、脓肿、溃疡、皮肤疣和局部淋巴结肿大。内脏感染还可引起黄疸、肾衰竭、左心室或右心室充血性心脏病、心包积液等。中枢神经系统感染则表现为抽搐、行为异常、昏厥等。
二、诊断
血细胞计数、血清生化指标分析、X线检查在等可反映相应组织器官的病理损伤，确诊则需进行相应的病原学检验。
1.直接检查 由于球囊较少，直接检查有一定的难度。皮肤渗出液或胸腔渗出液含菌量相对较多，方法是取皮肤病灶渗出物、痰液或脓汁少许置于载玻片上，滴加20％氢氧化钾溶液做透明处理后，覆以盖玻片直接镜检。当发现内含许多内生性孢子的圆形厚壁的小球状球囊时，即可确诊。
2.组织学检查 病理组织HE染色时球囊双壁染成蓝色。PAS染色时，球囊染成紫色，内孢子为鲜红色。因此，怀疑球孢子菌病时，应对多个脏器进行穿刺采样检查，以提高诊断率。
3.真菌培养 粗球孢子菌可在多种琼脂培养基上生长，形成白色绒状真菌菌落，随菌龄增加变为褐色或棕色。
4.动物接种 将分离菌接种动物，如接种于小白鼠腹腔，10 d内可在腹膜、肝、脾、肺等器官内发现典型的球囊和内孢子。另外，也可做双相型真菌鉴定，并在显微镜下观察其菌丝和关节孢子。
5.皮内试验 用未稀释的球孢子菌素0.1 mL对家兔进行皮内注射，24～48 h后，如出现直径达5 mm以上的水肿或红色硬结灶，则试验为阳性。
三、防治
1.治疗原则及方法 根据病犬、猫的临床症状，采取外科治疗和对症疗法。适用药物及用法如下。
酮康唑：犬口服，混于食物中，2次/d。猫口服，混于食物中，2次/d；或口服，混于食物中，1次/d。服药至少持续2～12个月，直到康复。此药有一定的不良反应。
伊曲康唑：口服，1次/d，其疗程比前者稍短。(https://www.daowen.com)
氟康唑：口服，混于食物中，2次/d。
伊维菌素：皮下注射，也有辅助治疗作用。
2.注意事项 如有扩散，全身抗真菌治疗最少1年，临床完全康复、X线检查病变消除后再继续治疗至少2个月。比较理想的是治疗一直延续到粗球孢子菌的抗体效价呈阴性。此病预后不确定，常有复发。如果复发，再给予治疗，直到病变消退；为了缓解病情，需要继续用低剂量治疗。
本病以预防为主。真菌能在土壤中生长，且在自然界中抵抗力较强，加强环境卫生管理可起到预防作用。另外，实验室工作人员在进行真菌培养时应注意避免被感染。
四、相关知识
球孢子菌病易发生于4岁以下户外活动较多的大、中型雄犬；随年龄的增加，其感染率降低。猫的感染性无品种、性别和年龄之间的差异。人与动物之间及动物与动物之间不能直接传染。
粗球孢子菌是一种双相性真菌。该菌在组织中形成小球体，也称为孢子囊，在自然界及培养基中则形成丝状分隔菌丝体，产生链状关节孢子，传染性及抵抗力很强。粗球孢子菌主要存在于夏季温度高、冬季温度适当的低海拔半干旱地区的碱性沙土中，为土壤腐生菌。在适宜的温、湿度等条件下大量增殖，产生许多孢子。实验室接种关节孢子可引起局部皮肤感染。
在本病流行地区，雨季过后干旱引发沙尘暴及其他因素引起土壤中大量关节孢子进入空气，导致球孢子菌病暴发。
在高温少雨季节，菌丝体潜藏于土壤表层之下。雨季过后，菌体回到土壤表面并形成孢子，释放出大量关节孢子并在旱季随风扩散。健康动物吸入10个以下的孢子即可感染发病。关节孢子被动物吸入后，从支气管周围组织扩散到胸膜下，发育成球囊并产生内孢子，引起严重的炎症反应，从而表现出呼吸道症状。组织胞浆菌可随血液和淋巴循环扩散至骨髓、关节、脾、肝、肾、心脏、生殖系统、眼、脑及脊髓等。与其他真菌感染相比，扩散性组织胞浆菌病较少见。猫皮肤感染多见。
五、病例举例
泰迪犬，2岁公犬，体重2 kg，检查可见腹部皮肤块状脱毛，瘙痒，病犬时常用脚挠患部。主人偶尔会带该犬到外面水库洗澡。
◆执业兽医资格考试相关试题
球孢子菌病的病原是（ ）。
A.伤寒沙门菌 B.破伤风杆菌 C.粗球孢子菌 D.奥氏蜜环菌
