二、常用建模方法

鉴于线粒体缺陷在其发病中的重要作用的工作，在实验中选用了线粒体呼吸链复合体Ⅱ/Ⅲ抑制剂3-NPA作为造模药，模拟临床HD患者的病理生理特点。

CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats Associated Protein，CRISPR/Cas9）系统是第三代人工核酸内切酶，与锌指核酸内切酶（Zinc Finger Endonuclease，ZFN）和类转录激活因子效应物核酸酶（Transcription Activator-Like EffectorNuclease，TALEN）都可用于各种复杂基因组的定点编辑。应用该技术已经成功对细菌、体外培养细胞、斑马鱼、小鼠等实现了较为精准高效的基因打靶修饰（基因沉默、敲除、敲入）。CRISPR/Cas9与ZFN和TALEN相比其优点不仅仅是在设计、合成等方面更为简便，而且其可以在一个细胞内同时进行多个基因的打靶编辑。(https://www.daowen.com)

3NP结构与琥珀酸类似，可与琥珀酸脱氢酶（SDH）的催化部位结合，抑制其活性，从而抑制了三羧酸循环，最终使大鼠表现出与HD相类似的病理改变、临床特征。3NP可通过改变体内钙蛋白酶（Calpain）、氧自由基的含量来诱导的纹状体变性的细胞内死亡，3NP还可通过谷氨酸盐、多巴腺苷等含量诱导的纹状体变性的细胞外环境的作用。