琼脂斜面保藏法

一、琼脂斜面保藏法

（一）斜面低温保藏法

斜面低温保藏法是最简单、最常用的保藏方法。即将菌种在适宜的斜面培养基上培养好后，将母种试管用纸包裹放入1～4℃的低温下保藏，以后每隔3～6个月传代1次。此法适用于绝大多数食用菌菌种保藏。有些食用菌菌种需在特定温度下保藏，如草菇对低温的忍耐力较差，其菌丝体在5℃下易死亡，因此，草菇菌种的保藏温度需在10～12℃，或者在草菇菌丝上加入3～4 mL的防冻剂（10％的甘油）后再低温保藏。

斜面低温保藏法注意事项：

（1）培养基选择要适当。保藏用的培养基要求含有丰富的有机氮，尽量减少糖的用量（2％以下）。天然培养基比合成培养基更适合于保藏菌种。

（2）用于保藏的菌种应接在新配制的培养基上，并在适温下培养至菌丝长满斜面。菌种培养时间不能太长，以免降低菌种活力和保藏时间。

（3）保藏菌种的试管口应用硅胶塞或橡皮塞封口，防止水分蒸发过快。保藏期间要经常检查有无杂菌污染及培养基是否干缩。如发现菌种被污染，要立即淘汰。(https://www.daowen.com)

（4）保藏的菌种要贴好标签，以防菌种混乱。

（5）要严格控制冰箱温度在1～4℃，不可过高或过低，否则均达不到保藏效果。保藏期间要保持温度的相对稳定，不得随意开启冰箱门。

（6）保藏的菌种每隔3～6个月要转管一次。

（7）保藏菌种在使用前要进行活化培养，即将保藏菌种在适温下培养一段时间后再移植。

（二）硅胶塞封口保藏法

硅胶塞封口保藏法方便实用，选与试管口大小相符的硅胶塞，先在0.2％的煤酚皂溶液内洗涤后再浸泡在75％酒精内保存。当斜面菌丝长满后，在无菌条件下，拔去棉塞，取出硅胶塞迅速塞入试管口内，并用石蜡熔封保藏。此法保藏菌种可存活3～4年，但以每年移植一次为好。