二、菌种培养

（一）母种的分离

母种培养基采用本书介绍的相关培养基或如下配方培养基：

（1）马铃薯200 g，葡萄糖30 g，磷酸二氢钾1 g，硫酸镁0.5 g，琼脂20 g，pH值6.0。

（2）葡萄糖30 g，蛋白胨15 g，磷酸二氢钾1 g，硫酸镁0.5 g，琼脂20 g，pH值6.0。

以上配方中，水均为1 000 mL。常规制备母种。

（二）原种培养

1.木钉原种培养基配方与制作　小松木钉（大小为1 cm×1 cm×0.5 cm）65％，松木屑11％，米糠或麦麸20％，糖2％，石膏1％，过磷酸钙1％。

先将木钉浸入1％～2％的糖水中6 h或煮沸30 min，再常规拌料、灭菌、接种，置25～28℃下培养，25～30 d菌丝长满瓶便可使用。(https://www.daowen.com)

2.木屑原种配方与制作　松木屑76％～78％，麦麸或米糠20％，糖1％～3％，石膏1％，含水量65％。制备方法同木钉培养基。

（三）栽培种培养

1.栽培种培养基配方

（1）松木屑70.6％，麦麸（米糠）25％，糖2％，过磷酸钙1％，石膏1％，尿素0.4％。

（2）松木片66％，松木屑10％，米糠（麦麸）21％，石膏1％，糖2％。

以上配方含水量均为60％～65％，pH值为6～7。

2.木片菌种制作方法　将长10 cm、宽3 cm、厚0.5 cm的松木片浸入1％～2％的糖水中4 h或煮沸30 min，再把麦麸、木屑和石膏混匀，拌入煮木片的糖水中，与木片一起装入菌种瓶或塑料袋内，封口后常规灭菌。

灭菌后，待料温降至30℃以下时无菌操作接入原种，置25～28℃下培养。栽培种的菌龄以袋内长满茯苓菌丝的木片能折断为好，适温下需培养45～55 d。