人精子存活试验
人精子存活试验是实验室检测培养基、配子胚胎接触性耗材、培养环境或者培养箱性能等不同培养条件变量的简便有效的方法,被广泛应用于临床工作中。此项实验的优点是材料便于取得,利用男科实验室剩余的精子即可。根据中华人民共和国医药行业标准YY/T 1535-2017《人类体外辅助生殖技术用医疗器械人精子存活试验》相关实验标准及方法,根据各自实验室的基本情况及待检变量不同(如不同批次试剂、耗材、实验材料及培养环境变化等),适时调整实验方案验证待检变量的可靠性。
1.人精子存活试验方法:
(1)将正常人精液进行优化处理后,调节活精子(活动精子参数,PR+NP)浓度为(5±2)×106/mL,活力大于90%,体积不小于0.6mL。
(2)样品制备后,在37℃培养箱中继续培养24h(YY/T 1535-2017行业标准)至120h(120h精子存活试验可以更灵活地发现实验室环境因素的异常),样品制备方式如下:
①制备阴性对照组:使用已通过人精子存活试验(SMI≥70%)测试的正常处理样本。
②制备阳性对照组:阴性对照组中添加64μmmol/L的甲醛。
③制备待测组:使用待测条件变量处理阴性对照标本(用待测变量进行正常操作,如不同批次试剂、耗材、实验标本及培养环境变化)。
(3)计算精子生存指数(SMI),公式为:
SMI=试验结束时精子活力/试验开始时精子活力
具体可以获得如下待检参数:
24h SMI=24h活动精子%/0h活动精子%
72h SMI=72h活动精子%/0h活动精子%(https://www.daowen.com)
120h SMI=120h活动精子%/0h活动精子%
(4)计算相对SMI,公式为:
相对SMI=测试组SMI/阴性对照组SMI×100%
(5)认真填写《胚胎实验室精子存活实验记录表》(表5.1)作为待测对象的质控记录并进行存档。
表5.1 胚胎实验室精子存活实验记录表
2.人精子存活实验的结果判读:
①阴性对照组SMI≥70%,且阳性对照组SMI＜60%视为有实验意义。
②待测变量SMI≥70%,且相对SMI≥90%,视为待测变量对人类精子的影响可以忽略,测试合格。
③待测变量SMI＜70%,或相对SMI＜90%,视为待测变量对人类精子的影响不可忽略,测试不合格。
3.精子存活实验的日常应用:人精子存活实验除启用实验室前对实验室进行功能验证功能外,新品类、新批号的配子胚胎接触材料或胚胎接触材料(如培养液、培养皿及其他耗材)到货时,均需要进行人精子存活实验验证、商品质量验证,留存详细的记录。实验合格后方可入库备用。
