辅助生殖实验室的工作安排
实验室的正式运行意味着可以正式开展人类胚胎培养工作,因此定制一个规律的、合理的工作计划是相当有必要的。
应遵循在非工作日避免安排其他科室可能参与的工作项目(如麻醉科参与无痛取卵等),确保排班合理,工作人员劳逸结合,避免工作人员过劳等原则进行工作安排,方可保证实验室工作顺利进行。当然,工作计划一旦制订,工作中应严格按照工作计划完成相关工作,才能使实验室的各项工作开展得井井有条。
结合开展相关实验的各个实验室工作经验,每日及每周工作计划与内容安排如表5.2所示。工作细则如下:
表5.2 胚胎实验室每周工作安排
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1.每日进入实验室后根据实验室环境质量控计划进行胚胎实验室及精液处理室的日常质控,检查净化系统是否正常运行,开启实验室空气净化设备,正常运行30min后,记录实验室各项指标,填写《IVF胚胎实验室室内培养环境日常质控表》《精液处理室室内环境及日常消毒质控表》《IVF胚胎实验室胚胎库环境日常质控表》。
2.每日根据培养箱日常质控,每周一在开启培养箱之前需进行培养箱气体浓度质控,完成后如实填写《培养箱日常质控表》。根据工作项目打开IVF工作站热台进行预热,将风机开至低档,根据计划对实验室仪器设备进行日常巡查,其余仪器设备开启使用时,根据日常使用流程进行操作,并根据仪器设备各自的质控表格进行“仪器设备的日常质控”。
3.控温设备每日开机使用时,待温度稳定后必须进行温度检测,之后方可开始使用,避免过热过冷导致对配子或胚胎的伤害,测温后填写《控温设备温度质控表》。
4.根据冰箱质控原则,进行每日(上午)冰箱质控,填写《冰箱质控表》。
5.每日根据《气瓶间日常质控表》《气瓶间气瓶统计表》所示内容进行气瓶间质控并记录。
6.每日根据《液氮库日常质控记录表》《胚胎储存库液氮罐日常质控记录表》表格项目进行质控,填写表格,每周一、周四添加液氮。
7.精液处理后第二天观察剩余精子状态并记录过夜后精子参数,计算精子存活指数。
8.(长授精)根据当天需要进行原核检查的患者数量进行剥卵皿的制备。
9.对受精卵进行原核检查,并填写《胚胎培养记录表》。
10.对当天达到Day3的胚胎进行卵裂胚评分,决定卵裂胚移植、冷冻、囊胚培养、丢弃等去向,并填写《胚胎培养记录表》。
11.对决定进行囊胚培养的胚胎进行换液处理,并填写《胚胎培养记录表》,签署《囊胚培养知情同意书》。
12.对当天达到Day5或Day6的胚胎进行囊胚评分,决囊胚移植、冷冻、丢弃等去向,并填写《胚胎培养记录表》。
13.当日早上根据取卵计划不通气预热箱外操作液及卵母细胞冲洗液。
14.取卵手术开始后进行捡卵操作直至捡卵操作结束,随时记录卵子状态。
15.当日取精患者根据计划逐个取精,并由实验室人员随时接收,待最后一个患者取精结束后进行精液处理,并将前向精子调整至适宜浓度。
16.根据医嘱、当日精子或卵子状态等因素确认最终授精方式,并签署《授精方式知情同意书》。
17.对计划移植的各类胚胎进行装胚并进行胚胎移植。
18.当日决定授精方式后,根据需要进行ICSI操作的患者数量,备齐剥卵皿。
19.进行ISCI患者的剥卵操作,操作后移入ICSI孵育皿,孵育至ICSI操作前。
20.当日决定授精方式后,根据需要进行ICSI操作的患者数量,完成ICSI操作皿的制作。
21.根据当日胚胎评价情况决定冷冻胚胎人数及数量,填写《冷冻知情同意书》,预热冷冻液,打印冷冻标签,准备冷冻载体,签署《胚胎冷冻知情同意书》。
22.进行常规授精的加精操作,并记录加精时间等参数。
23.进行ICSI操作,完善实验记录。
24.根据胚胎评分结果及当日胚胎冷冻计划进行胚胎冷冻操作。
25.获得次日胚胎解冻移植信息,根据需要进行解冻的胚胎数量预热解冻液,将胚胎库出库并进行解冻操作。
26.根据适应证筛选需进行辅助孵化的患者(如非6期囊胚解冻移植、反复着床失败者及高龄者等)签署辅助孵化知情同意书并进行辅助孵化。
27.(短授精)根据当天进行常规授精的患者数量备齐剥卵皿,以进行短授精观察。
28.(短授精)观察短授精胚胎的第二极体排出情况,统计受精率,决定是否进行补救ICSI。
29.对Day1胚胎进行早卵裂观察,并如实填写《胚胎培养记录表》。
30.了解次日需进行操作的患者情况,确定备液种类、数量等信息,并打印需要用到的标签。
31.根据次日取卵计划备齐足够的卵子操作的培养液、试管及培养皿等,并粘贴相应的患者标签。
32.根据次日需进行取精的患者数量备齐精液处理使用的培养液、试管并粘贴患者标签。
33.根据患者数量备齐授精皿数量,选择常规授精时授精皿为体外授精的液体环境,授精方式为ICSI时剥卵前需放入授精皿孵育。
34.此时备用的ICSI操作皿是次日用于ICSI操作的半成品,使用前需将洗精授精液换为箱外操作液和PVP。
35.根据取卵患者数量准备卵裂胚培养皿,用于常规授精时,观察完短授精后将胚胎移入;用于ICSI时,剥卵后转入卵裂胚培养皿孵育,ICSI操作后移回。
36.计划对胚胎进行时差培养(适用时差培养)时,需备时差培养皿。
37.根据囊胚培养计划与后日解冻移植计划使用囊胚培养皿准备足够数量的胚胎培养皿,两者制备方法相同。
38.根据次日移植计划(包括新鲜移植和解冻移植)使用囊胚培养液制备自购数量的移植皿。
39.根据次日使用计划及用途拉制足够的巴斯德吸管,并检查配套硅胶洗耳球是否足够。
40.完成并记录每日胚胎培养质控数据,并录入电子表格。
41.根据冰箱质控原则进行每日(下午)冰箱质控,填写冰箱质控表。
42.每日离开实验室前根据实验室环境质控计划进行胚胎实验室及精液处理室的日常质控,检查净化系统是否正常运行,记录实验室各项指标,关闭空气净化设备,填写《IVF胚胎实验室室内培养环境日常质控表》《精液处理室室内环境及日常消毒质控表》《IVF胚胎实验室胚胎库环境日常质控表》。
43.根据每日工作量统计,确认所有操作应收项目的金额、条目是否与实际收取的金额条目相符,并在系统中执行相关操作。
44.定期工作安排:
①每周一根据电子版胚胎培养记录总结上一周的胚胎培养质控记录进行周总结。
②每周二早交班时反馈一周胚胎培养质控总结,讨论疑难病例。
③每周三准备足够一周使用的耗材试剂,并对所有试剂耗材的库存状况进行了解,如库存不足时应及时订购。
④每周四进行科室业务学习,提高工作人员业务水平。
⑤每周五补充下一周足够的分装液体,包括取卵箱外操作液、卵泡冲洗液、PVP、透酶、ICSI箱外操作液、解冻液、冷冻液等。
⑥每周一、周四进行胚胎库的液氮添加。
45.进行每日工作量统计,记录每个工作人员的工作量,填写《胚胎实验室每日工作内容核查表》(表5.3)。
表5.3 胚胎实验室每日工作内容核查表
