卵裂胚观察标准化操作流程
1.将需要使用的IVF工作站预备至可用状态。
2.将培养至Day3(即受精后67～69h)的胚胎根据计划的新鲜移植顺序进行卵裂胚评价。
3.胚胎培养表中对每个胚胎逐个进行评价,评价内容及记录方法如下:
(1)细胞数:填写胚胎的细胞数。
(2)观察有无多核现象:有(Y),无(N)。
(3)细胞大小:均一(+),不均一(-)。
(4)细胞碎片占比:0(0%),1(＜10%),2(10%-25%),3(＞25%)。
(5)细胞内有无空泡:有(Y),无(N)。
(6)是否发生融合:有(Y),无(N)。
(7)手工评价:根据以上参数进行综合评价,如8G2-,代表该胚胎8细胞,碎片等级2,卵裂不均一。
(8)根据胚胎各项参数进行综合打分,具体评分标准如表5.10所示。(https://www.daowen.com)
表5.10 Day3胚胎评估细则表
(9)各不同实验室可能采用不同的卵裂期胚胎评价方案。在本方案中的“Day3胚胎评分细则“参考了“WIH胚胎评分方案”和“伊斯坦布尔共识”中根据细胞数、碎片量及细胞均一度纳入考量的两套方案,较适合初学者对Day3卵裂期胚胎进行客观形态学评价。
4.评价后统计优质胚胎个数,优质胚胎的定义:来源于正常受精卵,胚胎细胞数为7～9个、细胞大小符合发育阶段,碎片程度小于10%,无多核化的胚胎,即胚胎评分大于7分的胚胎。
5.将计划移植的胚胎移入移植皿粘贴患者标签后放入移植培养箱备用,并完善胚胎培养记录。
6.对未进行移植和冷冻的胚胎根据患者病史或医嘱,可进行囊胚培养,完成自然选择过程。如需进行囊胚培养,将需要进行囊胚培养的胚胎根据原来的标号移入平衡好的囊胚培养液继续培养,填写《囊胚培养知情同意书》转交护士,并提醒收取囊胚培养费。
7.将剩余需要冷冻及废弃的胚胎留在卵裂培养液中,根据冷冻数量准备相应材料与试剂,填写《胚胎冷冻知情同意书》转交护士,并提醒收取胚胎冷冻费。
8.如有患者要求进行辅助孵化的,让其填写《辅助孵化知情同意书》转交护士,并提醒其收取辅助孵化费。
9.填写《IVF实验室胚胎培养反馈表》及《胚胎情况通知单》,并将《胚胎情况通知单》转交当日负责移植的护士。
10.以上操作需严格落实双人核对制度。
