结核分枝杆菌潜伏感染的检测方法包括哪些？

目前最常用的结核分枝杆菌潜伏感染检测方法有三种，它们的免疫学机制不同，临床应用特点也不同。

（1）结核菌素皮肤试验（tuberculin skin test，TST）

基于Ⅳ型迟发型变态反应的皮肤试验，使用结核杆菌纯蛋白衍化物（purified protein derivative，PPD）抗原，采用皮内注射，经48～72小时判断是否存在结核分枝杆菌潜伏感染的情况。该方法操作简单，不需要特殊设备和实验室操作，是临床上广泛使用的结核分枝杆菌潜伏感染筛查和病原学阴性肺结核辅助诊断的免疫学方法。由于结核菌素有200多种抗原成分，其特异性易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌感染的影响。

（2）γ干扰素释放试验（IFN-γrelease assay，IGRA）(https://www.daowen.com)

使用结核分枝杆菌蛋白质的多肽抗原，包括ESAT-6、CFP-10和TB7.7（p4），刺激效应T淋巴细胞分泌γ干扰素，定量检测γ干扰素的水平或计数，判断是否存在结核分枝杆菌潜伏感染的情况。目前最常用的产品有两种，一种是基于酶联免疫吸附试验（ELISA）的Quanti FERON试验，用于检测全血γ干扰素的水平；另一种是基于酶联免疫斑点试验（ELIS-POT）的T-SPOT.TB试验，用于检测结核分枝杆菌特异性效应T细胞斑点数。IGRA采用的抗原与卡介苗及绝大多数非结核分枝杆菌无交叉，可避免卡介苗接种和非结核分枝杆菌感染的影响。由于其特异度较高，在临床上对病原学阴性的肺结核和肺外结核的辅助诊断应用价值较高。

（3）重组结核杆菌融合蛋白（EC）皮肤试验

通过基因工程方法表达ESAT-6和CFP-10两种蛋白的重组融合蛋白。ESAT-6仅存在于致病性结核分枝杆菌中；CFP-10可诱导分泌大量的γ-干扰素，诱发迟发性变态反应。感染过结核分枝杆菌的机体，具有对结核分枝杆菌的识别能力，当再次被结核分枝杆菌感染或注入微量重组结核杆菌融合蛋白时，机体血管通透性增加，巨噬细胞在局部集聚、浸润，48～72小时内可在局部出现红肿、硬结反应，据此判断是否存在结核分枝杆菌潜伏感染的情况。该方法具有操作简单、灵敏度和特异度高的特点，是结核分枝杆菌潜伏感染和病原学阴性肺结核诊断的新技术。