第七节 隐孢子虫
一、引言
隐孢子虫（Cryptosporidium Tyzzer，1907）为体积微小的球虫类寄生虫。广泛存在多种脊椎动物体内，主要为微小隐孢子虫，引起隐孢子虫病（cryptosporidiosis），是一种以腹泻为主要临床表现的人畜共患原虫病，被列为世界最常见的6种腹泻病之列，WHO于1986年将人隐孢子虫病定为艾滋病怀疑指标之一。隐孢子虫是重要的机会致病性原虫。
二、历史沿革
早在隐孢子虫由Tyzzer于1907年在小鼠胃消化腺上皮细胞内发现并命名和描述，但认为不致病。直到1955年Slavin发现火鸡隐孢子虫（Cryptosporidium meleagridis）可导致火鸡严重腹泻，隐孢子虫才引起人们注意。1976年，Nime等在美国首先报道人体病例。随着诊断技术不断提高，人体病例的不断增加。隐孢子虫不仅对免疫缺陷和艾滋病患者是机会性感染病原体，对于免疫力正常的患者也是一种重要的腹泻病原体。隐孢子虫属顶器复合门（Phylum Apicomplexa）、孢子虫纲（Class Sporozoasida）、球虫亚纲（Subclass Coccidiasina）、真球虫目（Order Eucoccidiorida）、艾美球虫亚目（Suborder Eimeriorina）、隐孢子虫科（Cryptosporidiidae）、隐孢子虫属（Cryptosporidium）。该属有10个种，其中可以感染人的主要是微小隐孢子虫（C.parvum）和人隐孢子虫（C.hominis）。微小隐孢子虫既可感染人，也可感染家畜。人隐孢子虫只感染人。
三、形态
卵囊呈圆形或椭圆形，大小为2～5μm，分为薄壁卵囊和厚壁卵囊。薄壁卵囊存在小肠绒毛区，直径约为1μm。厚壁卵囊可随粪便排出体外，具有2层囊壁，直径4～6μm。成熟的卵囊内含4个子孢子和颗粒状物质组成的残留体。子孢子月牙形，大小为1.5μm× 0.752μm，核一个位于虫体后部。抗酸染色呈玫瑰红色（图9－17、图9－18）。
图9－17 隐孢子虫卵囊模式图
图9－18 隐孢子虫卵囊形态
四、生活史
隐孢子虫生活史简单，无须转换宿主，完成整个生活史只需一个宿主。生活史包括无性生殖阶段的裂体增殖和孢子增殖，以及有性生殖阶段的配体生殖。人吞食了被成熟包囊污染的食物或水后，子孢子在消化液的作用下从包囊内逸出，侵入肠上皮细胞的微绒毛区形成纳虫泡。纳虫泡内的虫体进行裂体增殖，发育成滋养体，首先滋养体经3次核分裂，发育成Ⅰ型裂殖体，再经2次核分裂发育为Ⅱ型裂殖体。成熟的Ⅱ型裂殖体含有4个裂殖子，释放后可以侵入肠上皮细胞，也可进一步发育成雄配子体和雌配子体。两者结合形成合子，经孢子增殖发育成卵囊。薄壁卵囊在肠内，逸出子孢子侵入肠上皮细胞，进行裂体增殖，形成宿主的自体感染。厚壁卵囊经孢子化形成成熟的4个孢子后，随粪便排出体外。整个生活史需5～11天。
五、细胞和分子致病
隐孢子虫寄生于人的小肠上皮细胞刷状缘形成纳虫空泡，导致肠黏膜表面出现凹陷，破坏肠绒毛的结构，肠绒毛出现萎缩、变短或变粗或融合、脱落，从而破坏小肠正常生理功能，导致消化吸收障碍及腹泻。子孢子入侵肠上皮细胞后发育成裂殖子后，胀破细胞重新侵入新的上皮细胞。子孢子的表面蛋白复合抗原分子，丝氨酸酶及半胱氨酸蛋白酶等具有附着和吸附宿主细胞的功能；微小隐孢子虫还可以产生肠毒素。
六、临床学
人感染隐孢子虫卵囊后，多数患者发病并出现临床症状，少数患者发展为隐性感染的带虫者，其粪便可排出卵囊。潜伏期为1周左右，临床症状与机体的免疫状态相关。
免疫功能正常者：主要症状为自限性腹泻，病程1～2周，每日腹泻多次，粪便呈水样且量大，并伴有发热、恶心、食欲缺乏、腹部痉挛性疼痛和全身不适等症状。症状逐渐减轻或消失，但患者仍可持续数周排出卵囊。
免疫功能异常者：病情明显而严重，不能自愈，表现为持续性霍乱样水泻，一日数次至数十次，粪便量可达5～10L，可持续数周甚至终身，可导致难治性致死性腹泻，还可出现营养吸收障碍，出现肺部、胆道或其他呼吸道等肠外感染。艾滋病合并隐孢子虫感染，同时可并发肠外隐孢子虫病，如侵入呼吸道，引起慢性咳嗽、呼吸困难、支气管炎和肺炎，如侵入胆管和胆囊上皮，引起急性或坏死性胆囊炎。常是艾滋病患者致死的主要因素之一。(https://www.daowen.com)
儿童感染麻疹、水痘和巨细胞病毒后易感，可出现严重慢性腹泻。
七、诊断
主要包括病原学诊断、免疫学诊断和分子生物学诊断。我国在2007年制定了感染性腹泻诊断标准（WS271－2007），标准化隐孢子虫病的诊断。
1.病原学诊断 病原诊断主要是从患者粪便、呕吐物或痰液中查得卵囊。由于卵囊小，未染色易与标本中的颗粒混淆。常采用以下几种方法染色后镜检。①金胺－酚染色法：染色后卵囊在荧光显微镜下，低倍镜为圆形亮点，高倍镜卵囊带有乳白色或略带绿色荧光。②改良抗酸染色法：染色后卵囊为玫瑰红色，背景为蓝绿色。③金胺酚－改良抗酸染色法。
2.免疫学诊断 采用ELISA方法检测血清中特异性抗体，或用单克隆抗体检测隐孢子虫卵囊抗原。常用抗原有CP23、CSP蛋白，抗体多为识别隐孢子虫子孢子的单克隆抗体。
3.分子生物学方法 可采用PCR，DNA探针检测隐孢子虫基因，具有较高敏感性和特异性。检测目的基因有18S rDNA、乙酰辅酶A合成酶、热休克蛋白70等基因。
八、流行
隐孢子虫呈世界分布，除感染人体外，还可感染家畜、野生动物和鸟类等。同性恋并发艾滋病患者近半数感染隐孢子虫。在与患者、病牛接触的人群和在幼儿集中的单位，隐孢子虫腹泻暴发流行时有发生。在发展国家中，儿童感染率高。在腹泻患者中，发达国家隐孢子虫病的流行率为0.1％～27.1％，不发达国家为0.1％～31.5％，我国流行率为1.36％～13.3％。
隐孢子虫病的主要传染源为感染隐孢子虫患者和无症状的带囊者，动物传染源包括牛、羊、猫等。隐孢子虫病患者的粪便和呕吐物中含有大量卵囊，患者腹泻停止后数日甚至数周后仍有卵囊排出。
传播途径有接触传播、水源传播、食物传播和空气传播。粪口途径的直接传播和食物传播是发展中国家的主要传播方式，水源传播是发达国家暴发隐孢子虫流行的主要传播方式。
人对隐孢子虫普遍易感，免疫缺陷患者感染后病情严重。
九、治疗和预防
1.预防本病的重要措施 加强粪便管理，避免卵囊污染食物和水源；注意饮食卫生和环境卫生；保护免疫力低下人群，避免接触患者、病畜和宠物。
2.治疗 目前尚无效药物，主要对症治疗。可采用的治疗药物有巴龙霉素、螺旋霉素、大蒜素等。卵囊疫苗正在研制当中。
（付永锋）