2.2.1 实验材料与仪器
2.2.1.1质粒
本文所用质粒：
●p UAST-Wnd-EGFP本实验室构建
●p UAST-Rho1-HA本实验室构建
●p UAST-MKK4-HA本实验室构建
●p Ac5.1/V5-HisB-YkiHA由吴世安教授（南开大学）提供
●p Ac5.1/V5-HisB-Sd由吴世安教授（南开大学）提供
●p GL3-Basic-Rho1-E1本实验室构建
●p GL3-Basic-Rho1-E2本实验室构建
●p GL3-Basic-Rho1-E3本实验室构建
●pCS2-Rho1本实验室构建
●引物合成与质粒测序上海赛音
2.2.1.2细胞株
所有试验均用果蝇S2（Schneider 2）细胞进行，培养在28℃培养箱中。培养基为Insectagro®DS2（Corning）含10%胎牛血清（HyClone），加入50U/m L青霉素及50μg/m L链霉素。
2.2.1.3试剂
●NaCl，EDTA，甲醇国药
●Trypton，酵母提取物OXOID公司
●Glycine，Tricine VETEC公司
●吐温20阿拉丁
●琼脂上海维编
●SDS生工
●脱脂奶粉BD公司
●琼脂糖BIOWEST公司
●SDS-PAGE蛋白上样缓冲液碧云天
●SDS-PAGE凝胶配制试剂盒碧云天
●RIPA Buffer CST
●Red Protein G Affinity Gel Sigma
●Albumin Bovine V北京拜尔迪(https://www.daowen.com)
2.2.1.4抗体
●mouse anti-Rho1 DSHB
●β-tubulin CMC Scientific
●mouse anti-EGFP CMC Scientific
●rabbit anti-HA CMC Scientific
●guinea pig anti-Sd由James B.Skeath教授提供
●anti-rabbit-Alexa CST
●goat anti rabbit/mouse IgG-HRP CST
●mouse IgG CST
●doneky anti-mouse-Cy3 Jackson Immuno Research
2.2.1.5仪器
●上海一恒DHP-9032电热恒温培养箱
●上海世平SPH-1102C恒温培养振荡器
●上海精宏DK-8D电热恒温水槽
●上海天能EPS-300核酸电泳仪
●北京松源华兴SL-Ⅱ数控层析实验冷柜
●江苏海门其林贝尔TS-8脱色摇床，QB-228旋转培养器，QL-861涡旋混合器，ZF-1紫外线分析仪，GL-150干式恒温器
●广东美的MM723HDL-PW微波炉
●德国Eppendorf5424离心机，Mastercycler PCR仪
●美国Thermo Scientific Legend Sorvall Legend Micro 21R高速冷冻离心机，FORMA 700 series-80℃冰箱，NanoDrop 2000分光光度计
●美国Millipore Milli-Q Advantage A10纯水仪
●美国Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra小型蛋白电泳槽
●美国Agilent Mx3005P荧光定量PCR仪
●美国Molecular devices flexstation 3酶标仪
●美国Cole-parmer instruments超声破碎仪
●美国GE ImageQuant LAS 4000化学发光成像分析仪
●日本Olympus BX51荧光显微镜
●日本TOMY SX-500高压灭菌锅