10.3　Rho1与Wnd能够相互作用

已有报道表明Rho1能与同为MAPKKK家族成员的d TAK1及Slipper（Slpr）相互作用进而调控JNK信号通路介导的细胞凋亡[158]。与此相符的是，我们发现下调wnd也能够部分抑制Rho1引起的细胞死亡（图10-2 L，M），而我们尚未发表的结果显示Wnd调控了JNK信号通路介导的细胞死亡。基于以上结果，我们猜测Rho1可能通过与Wnd相互作用进而激活了下游信号通路。为了验证这个假说，我们首先检测了Rho1与Wnd在果蝇S2细胞中的定位情况，单独转染Wnd时，Wnd均匀分布于细胞质中（图10-3 A）；单转Rho1时在细胞质与细胞核中均能检测到Rho1表达（图10-3 B），当共转Rho1与Wnd时，我们发现Rho1与Wnd在细胞质与细胞核中都有很好的定位（图10-3 C）。接下来我们又用了免疫共沉淀（co-IP）的方法检测了两者之间的相互作用。结果显示，过表达的Rho1能够与过表达的Wnd在S2细胞中发生相互作用（图10-3 D）。

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图10-3　Rho1与Wnd在S2细胞中相互作用（见彩图30）

（A—C）荧光显微镜果蝇S2细胞抗体染色图片。过表达的Rho1与Wnd共定位在细胞质与细胞核中。免疫荧光所用抗体为HA（红色）和DAPI（蓝色）。
（D）在S2细胞中共转HA-Rho1与EGFP-Wnd后进行co-IP实验，结果显示Wnd能够与Rho1发生相互作用。