10.4　Wnd过表达能够诱导EMT

图10-4　过表达Wnd能够诱导EMT（见彩图31）(https://www.daowen.com)

荧光显微镜3龄幼虫翅成虫盘抗体染色图片。与对照相比（A，D，G，ptc-Gal4 UASGFP/+），过表达Wnd能够引起细胞迁移，激活MMP1表达，下调E-cad表达，并引起细胞骨架重塑（B，E，H，ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-Wnd；tub-Gal80ts/+），而过表达Wnd KD却不能引起明显表型（C，F，I，ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-Wnd KD）。

既然wnd下调能够抑制Rho1诱导的细胞迁移的发生并且能与Rho1相互作用，于是我们推测也许过表达Wnd能产生与Rho1类似的细胞迁移表型。由于在翅成虫盘中用ptc-Gal4过表达野生型的Wnd会致死，因此我们改用温度敏感型的tub-Gal80ts控制性地表达Wnd。结果显示过表达Wnd能够诱导很强的细胞迁移表型，大量细胞会向后部迁移（图10-4 B′），并伴随着MMP1的高度激活（图10-4 B″），并且这些表型不能被表达p35抑制（未显示），表明该迁移表型不是细胞死亡产生的后果。此外，我们还发现Wnd过表达显著性地降低了E-cad的表达（图10-4 E′），同时能够影响表皮细胞的完整性，上调肌动蛋白（actin）及整理蛋白（integrin）的表达（图10-4 H，未显示）。这些结果表明过表达Wnd能够赋予细胞很强的侵袭与迁移能力，促使EMT过程的发生。同时我们发现过表达激酶失活型的Wnd（Wnd KD）则不能产生任何明显表型（图10-4 C，F，I），说明Wnd的功能实施依赖于其激酶活性。