胶体染料试纸条免疫检测法

三、胶体染料试纸条免疫检测法

（一）原理

胶体染料试纸条免疫检测法的基本原理是利用双抗原夹心法的原理检测人体内抗血吸虫抗体。以兔抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）IgG抗体和羊抗人IgG抗体，分别固相于硝酸纤维膜，以胶体染料（D-1）标记的日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）和待检血清的混合反应液作为液相，应用层析式原理检测血清中的抗血吸虫抗体。

（二）试剂与器材

（1）市售试剂盒配有检测所需的试剂和材料，包括试纸条、标记抗原液、聚苯乙烯杯。

（2）器材：平板式混匀器、10～100μl可调式移液器、移液器吸头（200μl）。

（三）操作方法

（1）轻轻颠倒混匀染料标记抗原液，使沉淀完全混悬。

（2）取聚苯乙烯小杯，每小杯加入50μl染料标记液，再加20μl待检血清，放置于混匀器上混匀反应1分钟。

（3）取试纸条，将吸水垫较短的一端插入小杯中，待小杯内反应液吸干后（约10分钟左右）观察结果。

（四）结果判读（见图5-4）

（1）阳性反应：检测带和对照带都出现紫蓝色带。(https://www.daowen.com)

（2）阴性反应：对照带出现紫蓝色带而检测带无显色带。

（3）无效：检测带和对照带都不出现显色带。

（五）诊断意义

主要用于血吸虫病辅助诊断，不能作为确诊依据。可用于对血吸虫病人的筛查，需结合疫水接触史、临床症状和粪便病原学检查等结果综合分析。

（六）注意事项

（1）检测血清必须新鲜，否则会影响检测结果。

（2）取试纸条时，用手捏住吸水垫较长的一端，不能触摸检测膜。

（3）检测时试纸条一定要插入杯底。

（4）检测带反应过强时，对照带显色会减弱甚至不显色，此时仍可将结果判定为阳性。

（5）该检测法与肺、肝吸虫病人血清有部分交叉反应，检测时应予注意。