半乳糖对离层形成的影响

从上述树皮中可溶性糖和淀粉含量变化的结果表明，脱落前不仅棉铃中碳水化合物下降［3］，连离层的周围组织中碳水化合物也是减少的。为了进一步阐明糖类和离层形成的关系，我们采用了切片离体培养的方法，观察半乳糖对离层细胞中胶层果胶物质分解的影响。

离体培养系根据Robert（1960）报道的离体材料中胶层溶解代谢的研究方法［44］，并加以简化，即培养时不加果胶水解酶，而将当天开的花进行脱落的人工处理，然后在脱落前1天（即处理后第3天）把材料从植株上剪下，在水中略浸后，取出制成新鲜的纵切片，厚度约为30～50 μm，并按无菌操作进行组织培养，培养分下列三组：

（1）水（对照1）。

（2）完全培养液加0.16 mol/L离子拮抗液（对照2）。

（3）完全培养液加3%（即0.16 mol/L）的半乳糖溶液。

完全培养液按改进的White氏液配制［8］，内含1.5%的蔗糖，少量氨基酸、维生素及各种矿质离子。离子拮抗液是由9份NaCl∶1份CaC12配成。加离子拮抗液是为了抵消处理中加入半乳糖后渗透压增高所可能引起的影响，而离子拮抗液对细胞并无损害作用［15］。(https://www.daowen.com)

每一处理在三角瓶中分别加入20 ml上述各组溶液和5片纵切面组织，在（28±1）℃中培养，每隔一定时间在显微镜下观察离层细胞中胶层的溶解情况，以间苯三酚染色法作为鉴定标准，如果有离层形成，则有樱红色反应。结果如表3所示。

表3　半乳糖对棉铃果柄离层轴胞中胶层溶解的影响*

注：*+表示有樱红色反应；—表示无染色反应。
（1）离层形成需要正常的生理环境及营养物质的供应，在水中培养时，由于缺乏这些因素，故离层细胞的中胶层不发生溶解。
（2）在完全营养液中培养时，由于与正常的生理环境相类似，故发生中胶层的溶解。
（3）半乳糖有抑制离层细胞中胶层溶解的作用，而蔗糖并无这种效应（对照2），可见半乳糖与果胶物质的代谢有着密切的关系。

从表中可见培养在完全营养液中的离体材料经60 h后，离层细胞的中胶层便开始溶解，果胶质发生转化；而培养在水中或完全营养液加半乳糖溶液中的材料，则经过108 h尚无中胶层的溶解。